1、原公告项目名 称： (略) 省动物疫 (略) * 年实验室试剂采购项目

2、原公告项目编号：[ * ]GK[TP] 点击查看>>

3、首次公告日期： * 日

4、更正（补充）事项及内容：
1、原谈判文件第 * 章第 * 大点“招标货物 * 览表”变更为：

合同包	品目	产品名 称	技术参数、规格要求	单价限价（元）
1	1	布病试管凝集诊断试剂（含阴阳性血清）	详见“招标内容及要求”。	*
2	PPR竞争ELISA	*
3	PPR套式PCR	*
4	PPRsybergreenPCR	*
5	过滤柱型病毒核酸提取试剂盒	*
6	口蹄疫A/O/C/AsiaI型抗体检测阻断快速ELISA试剂盒	*
7	* 步法液相阻断口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒	*
8	LB-ELISA口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒	*
9	O型抗体固相竞争ELISA试剂盒	*
*	可拆分板预分装核酸提取试剂盒	*
*	FMDA/O抗体快速检测试剂盒	*
*	CS/gE/gB/CRV/CDV/CPV/PPR型抗体快速检测试剂盒	*
*	PCV抗体快速检测试剂盒	*
*	电泳法检测FMD通用/Asia-I型/BVDV/牛冠状病毒/牛副流感病毒/小反刍兽疫/狂犬病病毒巢式/犬瘟热/犬猫冠状病毒/犬呼肠孤病毒/犬副流感病毒/猫杯状病毒/兔瘟RNA病毒检测试剂盒	*
*	FAM荧光基团检测FMD通用/Asia-I型/O型/A型/C型/BVDV/牛冠状病毒/牛副流感病毒/牛合胞体病毒/小反刍兽疫/小反刍兽疫病毒野毒株/狂犬病/犬瘟热/犬猫冠状病毒/犬副流感病毒/猫杯状病毒/哺乳动物呼肠孤病毒/荧光RNA病毒检测试剂盒	*
*	电泳法检测PRV/PRVgE/PPV/PCV/ (略) 性腹泻病毒/非洲猪瘟/JEV/BB/牛疱疹病毒Ⅰ型/炭疽杆菌/弓形虫/钩端螺旋体/犬细小病毒/犬腺病毒/犬腺病毒1型/犬腺病毒2型/猫泛白细胞减少症病毒/猫疱疹病毒1型/支原体/猪应激基因PCR-RFLPDNA检测试剂盒	*
*	FAM荧光基团检测PRV/PRVgE/PPV/PCV1/PCV2/ (略) 性腹泻病毒/猪轮状病毒/猪传染性胃肠炎/非洲猪瘟/JEV/BB/牛疱疹病毒Ⅰ型/弓形虫/钩端螺旋体/犬细小病毒/犬细小病毒野毒株/猫泛白细胞减少症病毒/猫疱疹病毒1型/衣原体/荧光PCRDNA病毒检测试剂盒	*
*	猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重核酸检测	*
*	猪圆环病毒1型和2型双重实时荧光PCR检测试剂盒	*
*	猪传染性胃肠炎、 (略) 性腹泻、猪轮状病毒 * 重实时荧光RT-PCR检测试剂盒	*
*	口蹄疫病毒NS抗体/弓形虫/狂犬病（定性/定量）/动物包虫/犬细粒棘球绦虫ELISA试剂盒	*
2	2-1	高兰实时荧光PCR试剂盒	详见“招标内容及要求”。	*
	2-2	高兰普通PCR试剂盒		*
3	3-1	禽流感H7亚型荧光PCR试剂盒		*
4	4-1	禽流感血凝/血凝抑制（HA/HI）血清/抗原		*
5	5-1	鸡白痢胶体金试剂盒		*
6	6-1	口蹄疫和塞尼卡谷病毒PCR		*
	6-2	塞尼卡谷病毒ELISA		*

2、原谈判文件第 * 章第 * 大点“技术和服务要求”中第 * 点“招标内容及要求”变更为：

合同包1： 

品目号1-1：布病试管凝集诊断试剂（含阴阳性血清）

1.试剂用途：诊断布鲁氏菌菌柄试管凝集试验用

2.规格： * 头份/5ml/瓶

3.保存条件:2~8℃保存

4.样本要求:血清

5.试剂原理:试管凝集

6.操作过程:比浊对照管配制：1: * 稀释抗原用等量稀释液稀释（1: * ）后，再用稀释液配制成含1: * 抗原0%、 * %、 * %、 * %、 * %的悬液。血清稀释：被检血清及阴、阳性对照血清都作 * .5、 * 、 * 、 * 、 * 倍稀释。将0.5ml1: * 稀释抗原和0.5ml各稀释度血清在小试管（直径约1cm）中分别混合，置 * ℃温箱中反应 * 小时后，取出试管， (略) 位与比 (略) 浊度比较，读取浊度结果。

7.成立条件:反应试管内浊度接近 * %1: * 抗原浊度，记录为“—”，表示无反应；接近 * %，记录为“+”，表示有接近 * %的反应；接近 * %，记录为“++”，表示有接近 * %的反应；接近 * %，记录为“+++”，表示有接近 * %的反应；接近0%，记录为“+++”，表示有接近 * %的反应。

8.结果判定:牛、鹿、骆驼等大动物血清最终稀释度（是血清稀释度的2倍数）1: * 及以上出现“++”反应判定为阳性反应，1: * 出现“++”反应判定为可疑反应，否则判为阴性反应。猪、羊、犬等中小动物1: * 及以上出现“++”反应判定为阳性反应，1: * 出现“++”反应判定为可疑反应，否则判为阴性反应。

9.试剂盒要求:稀释液：0.5%苯酚生理盐水。抗原稀释：布氏菌病试管凝集试验抗原作1: * 稀释使用。主要成分为抗原性良好的灭活布鲁氏菌菌体抗原。

保质期:到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-2：PPR竞争ELISA

1.试剂用途:监测羊群中PPRV抗体水平

2.规格: * 次/盒

3.保存条件:2-8度

4.样本要求:血清

5.试剂原理:ELISA

6.操作过程:阳性血清， * μL/孔。阴性血清， * μL/孔。2孔稀释液对照， * μL/孔。样品孔中加入稀释液和血清各 * μL/孔。 * ℃ * min。洗涤。每孔加单抗（1×）， * μL/孔。 * ℃ * min。洗涤。每孔加入底物溶液， * μL/孔。作用 * - * min。每孔中加入 * μL终止液， (略) 有的反应。 * nm的波长下测定各孔OD * nm值，计算阻断率。

7.成立条件:PB= * -（样品 * ）/对照

8.结果判定:阳性对照阻断率（PB）＞ * ，阴性对照阻断率（PB）＜ * ，试验结果有效；否则， (略) 试验。待检样品阻断率（PB）＞ * ，判为阳性。待检样品阻断率（PB）≤ * ，判为阴性。

9.保质期到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-3：PPR套式PCR

1.试剂用途:小反刍抗原检测

2.规格:≥ * 头份/盒

3.保存条件:- * °C保存

4.样本要求:扩增用试剂（采用反转录、扩增 * 步法）- * ℃保存

5.试剂原理:拭子、组织、环境样品

6.操作过程: * oC,3 (略) 反转录；然后 * oC, (略) Taq酶的激活； (略) * 个循环的PCR扩增（扩增条件为 * oC, * sec， * oC, * sec， * oC, * sec）； (略) * oC,7min的延伸。

7.成立条件:阳性对照有条带，阴性对照无条带。

8.结果判定:待测样品出现与阳性对照大小 * 致的扩增条带（大小约为 * bp），则结果判为普通RT-PCR阳性，否则结果判为普通RT-PCR阴性。

9.保质期到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-4：PPRsybergreenPCR

1.试剂用途:小反刍抗原检测

2.规格:≥ * 头份/盒

3.保存条件:- * °C保存

4.样本要求:扩增用试剂（采用反转录、扩增 * 步法）- * ℃保存

5.试剂原理:拭子、组织、环境样品

6.操作过程:商业化试剂盒纯化核酸。 * oC,3 (略) 反转录；然后 * oC, (略) Taq酶的激活； (略) * 个循环的PCR扩增（扩增条件为 * oC, * sec， * oC1min收集荧光信号，其中报告荧光为FAM，淬灭荧光为TAMRA）。

7.结果判定:阳性对照应出现特异性扩增曲线且Ct值小于 * ，阴性对照无Ct值且无特异性扩增曲线。如果待测样品的Ct值小于 * 且有特异性扩增曲线则结果判为强阳性；若Ct值大于 * 小于等于 * 且有特异性扩增曲线则判为弱阳性；若Ct值大于 * 则判为阴性。

8.试剂盒要求:不需提取试剂。

9.保质期到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-5：过滤柱型病毒核酸提取试剂盒

1.试剂用途:过滤柱型病毒核酸提取试剂盒病毒核酸提取

2.规格: * 头份/盒

3.保存条件:室温保存

4.样本要求: * μL血浆，血清，体分泌物或细胞培养物上清液

5.试剂原理:过滤柱吸附核酸。提取出的DNA或RNA可立即用于RT-PCR、PCR、ReaL-timePCR等分子生物实验。不需要苯酚/氯仿提取，也不需要用酒精沉淀

6.保质期:到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-6：口蹄疫A/O/C/AsiaI型抗体检测阻断快速ELISA试剂盒

1.试剂用途：口蹄疫A/O/C/AsiaI型抗体检测阻断快速ELISA试剂盒本品采用酶联免疫阻断法检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫A/O/C/AsiaI型抗体，适用 (略) 口蹄疫疫苗免疫状况。

2.规格： * T×1块

3.保存条件：试剂盒2~8℃存放

4.样本要求：血清

5.试剂原理：包被板上包被口蹄疫重组蛋白，固相阻断方法

6.操作过程：相应的孔分别加入阴性、阳性对照、已稀释样品 * μL，加酶结合物 * μL， * ℃温育 * min。洗涤液洗板5次， * ℃温育 * min。加入显色液A、B各 * μL，加入终止液 * μL，酶标仪读值（ * nm）

7.成立条件：试验成立判断标准：PC＜0.2；NC＞0.5。

8.结果判定：S/N=(NC-样品)/(NC-PC)；如果S/N值＜0. * ，样品应判定为AsiaI抗体阴性；如果S/N值≥0. * ，样品应判定为AsiaI抗体阳性。如果S/N值＜0.5，样品应判定为A抗体阴性。如果S/N值≥0.5，样品应判定为A抗体阳性。如果S/N值＜0.4，样品应判定为O抗体阴性；如果S/N值≥0.4，样品应判定为O抗体阳性。

9.试剂盒要求：反应时间≤ * 分钟

* .配套要求：每块板可检测样品 * 份，浓缩洗涤液 * ×稀释，用样品稀释液 * 倍稀释待检样品，不稀释阴阳性对照

* .保质期到用户手上有效期≧9个月

 

品目号1-7： * 步法液相阻断口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒

1.试剂用途： * 步法液相阻断口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒本品采用酶联免疫阻断法检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫A/O/C/AsiaI型等抗体，适用于动物疫苗免疫抗体监测。

2.规格： * T× * 块

3.保存条件：试剂盒2~8℃存放

4.样本要求：血清

5.试剂原理：酶联免疫液相阻断法

6.操作过程：加入阴性对照 * μL、阳性对照 * μL、待检样品 * μL，进行梯度稀释；将第 * 步的液体转移到包被板，每孔 * μL，然后加入稀释后的病毒抗原各 * μL，病毒抗原对照孔单独加 * μL，振荡混匀； * ℃温育 * min；洗涤液洗板5次；加入抗体溶液 * μL/孔，酶结合物 * μL/孔； * ℃温育 * min；洗涤液洗板5次；加入混合显色液 * μL/孔； * ℃避光温育 * min；加入终止液 * μL/孔；酶标仪读值（ * nm）

7.成立条件：病毒抗原对照OD值应在2.0±1.0范围内；阳性对照抗体效价应在1: * ±1滴度以内；阴性对照抗体效价应＜1:8。

8.结果判定：抗体效价≥1: * ，判为阳性；抗体效价≤1: * ，判为阴性；抗体效价在1: * ～1: * 时，判为可疑。可疑待检样品需复测，复测抗体效价≥1: * ，判为阳性，＜1: * 判为阴性。

9.试剂盒要求：反应时间≤ * 分钟

* .配套要求：可检测样品 点击查看>> 份，浓缩洗涤液 * ×稀释

* .保质期到用户手上有效期≧9个月

 

品目号1-8：LB-ELISA口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒

1.试剂用途：LB-ELISA口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒本品采用酶联免疫液相阻断法检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫A/O/C/AsiaI型等抗体，适合于动物疫苗免疫抗体监测

2.规格： * T× * 块

3.保存条件：试剂盒2~8℃存放

4.样本要求：血清

5.试剂原理：酶联免疫液相阻断法

6.操作过程：加入阴性对照 * μL、阳性对照 * μL、待检样品 * μL，进行梯度稀释，然后加入稀释后的病毒抗原各 * μL，病毒抗原对照孔单独加 * μL； * ℃温育2h；将第 * 步的液体转移到包被板，每孔 * μL； * ℃温育 * min；加入抗体溶液 * μL/孔； * ℃温育 * min；洗涤液洗板5次；加入混合显色液 * μL/孔； * ℃避光温育 * min；加入终止液 * μL/孔；酶标仪读值（ * nm）

7.成立条件：病毒抗原对照OD值应在2.0±1.0范围内；阳性对照抗体效价应在1: * ±1滴度以内；阴性对照抗体效价应＜1:8。

8.结果判定：抗体效价≥1: * ，判为阳性；抗体效价≤1: * ，判为阴性；抗体效价在1: * ～1: * 时，判为可疑。可疑待检样品需复测，复测抗体效价≥1: * ，判为阳性，＜1: * 判为阴性。

9.试剂盒要求：反应时间≤ * 分钟

* .配套要求：可检测样品 点击查看>> 份，浓缩洗涤液 * ×稀释

* .保质期到用户手上有效期≧9个月

 

品目号1-9：O型抗体固相竞争ELISA试剂盒

1.试剂用途：O型抗体固相竞争ELISA试剂盒检测牛、羊、猪等偶蹄动物血清中口蹄疫O型抗体

2.规格： * 孔/板×3块

3.保存条件：所有试剂保存于2~8℃

4.样本要求：血清

5.试剂原理：待检血清样本与O型酶标抗体竞争结合O型口蹄疫病毒抗原位点。将待检抗体按2倍梯度稀释后加入到相应的固相抗原孔中，随之给对应孔中加入O型口蹄疫酶标 (略) 孵育。当待检标本中抗体量越多，结合在固相上酶标板上的酶标抗体愈少，阳性反应呈色浅于阴性反应。

6.操作过程：将稀释板整体平移至包被反应板中，每孔 * μL； (略) 有反应孔加 * μL，标抗体工作液，轻轻震荡， * ℃ * 分钟。洗涤3~5次，每孔加底物溶液 * μL，于 * ℃5～ * 分钟后每孔加 * μL终止液。当稀释血清移至反应板后，再加入等量的酶标抗体工作液，此时血清的稀释度加倍，被检血清从1:8~1: * ，由于阳性对照血清已经预先做了1:8倍稀释，则变为1: * ~1: * 。

7.成立条件：竞争抗体对照至少2个孔的OD * nm值在0.9～2.5范围内；阴性对照血清抗体效价应<1:8；阳性对照抗体效价应在1: * ±1个滴度范围内。

8.结果判定：以竞争单抗对照平均OD * nm值的 * %为临界值，被检血清OD * nm值大于临界值的孔为阴性孔，小于等于临界值的孔为阳性孔。抗体效价大于或等于1: * 判为口蹄疫O型抗体阳性；小于或等于1: * 判为口蹄疫O型抗体阴性，介于两者之间为可疑。

9.试剂盒要求：浓缩洗液 * ×稀释，可 (略) 抗体效价滴度测定检测 * / * /4 (略)

* .配套要求：TMB底物

* .保质期：到用户手上有效期≧9个月

 

品目号1- * ：可拆分板预分装核酸提取试剂盒

1.用途：病毒核酸提取

2.规格: * 头份/盒

3.试剂要求：可拆分板。

4.试剂原理：磁珠法

5.保存条件:室温保存

6.保质期:到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1- * ：FMDA/O抗体快速检测试剂盒

1.试剂用途：检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫病毒O/A型抗体

2.规格：≥ * 份/盒。

3.保存条件：2～8℃保存

4.样本要求：血清

5.试剂原理：免疫层析法检测；双抗原夹心法捕获被测样本中的病毒抗体

6.操作过程：样品 * 倍稀释，加 * uL到试剂卡中，避光静置 * 分钟后即可测量结果。

7.保质期：到用户手上有效期大于等于9个月。

 

品目号1- * ：CS/PRRS/PRV/CRV/CDV/CPV/PPR型抗体快速检测试剂盒

1.试剂用途：检测猪、牛、羊血清中的CS/PRRS/gE/gB/CRV/CDV/CPV/PPR抗体

2.规格：≥ * 份/盒。

3.保存条件：2～8℃保存

4.样本要求：血清

5.试剂原理：免疫层析法检测；双抗原夹心法捕获被测样本中的病毒抗体

6.操作过程：样品 * 倍稀释，加 * uL到试剂卡中，避光静置 * 分钟后即可测量结果。

1.保质期：到用户手上有效期大于等于9个月。

 

品目号1- * ：PCV抗体快速检测试剂盒

1.试剂用途：检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫病毒O/A型抗体

2.规格：≥ * 份/盒。

3.保存条件：2～8℃保存

4.样本要求：血清

5.试剂原理：免疫层析法检测；双抗原夹心法捕获被测样本中的病毒抗体

6.操作过程：样品 * 倍稀释，加 * uL到试剂卡中，避光静置 * 分钟后即可测量结果。

7.保质期：到用户手上有效期大于等于9个月。

 

品目号1- * ：电泳法检测PRRS/HP-PRRS/FMD通用/Asia-I型/BVDV/牛冠状病毒/牛副流感病毒/小反刍兽疫/狂犬病病毒巢式/犬瘟热/犬猫冠状病毒/犬呼肠孤病毒/犬副流感病毒/猫杯状病毒/兔瘟RNA病毒检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。扩增用试剂（采用反转录、扩增 * 步法）- * ℃保存。

2.试剂盒规格：≥ * 份/盒。

3.反应程序为： * ℃≤ * min， * ℃≤3min；循环 * ℃≤ * s， * ℃≤ * s， * ℃≤ * s，共 * 次；再 * ℃延伸 * min。

4.反应体系≥ * μL。

5.结果判定：阳性对照出现扩增带、阴性对照无带出现（引物带除外）时，实验结果成立。被检样品出现扩增带为阳性，否则为阴性。

6.有效期≥6个月。

 

品目号1- * ：FAM荧光基团检测PRRS/HP-PRRS/ HP-PRRS  JXA1-R株/PRRS 美洲株/PRRS 欧洲株/ PRRS 类NADC- * 毒株/ FMD通用/Asia-I型/O型/A型/C型/BVDV/牛冠状病毒/牛副流感病毒/牛合胞体病毒/小反刍兽疫/小反刍兽疫病毒野毒株/狂犬病/犬瘟热/犬猫冠状病毒/犬副流感病毒/猫杯状病毒/哺乳动物呼肠孤病毒/荧光RNA病毒检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。- * ℃保存； (略) 禽流感H9亚型毒株，敏感性达到 * %以上，灵敏度与鸡胚分离法接近。

2.规格：≥ * 份/盒。

3.反应程序： * ℃≤ * min， * ℃≤1min； * ℃≤5s， * ℃≤ * s，在每个循环第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号，共≤ * 个循环。（报告基团“FAM”，淬灭基团“None”）。

4.反应体系为≥ * μL。

5.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为阳性；被检样品 * ＜Ct＜ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取RNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，可判定为阳性；被检样品Ct值≥ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

6.到用户手上有效期≥9个月。 

 

品目号1- * ：电泳法检测PRV/PRV gE/PPV/PCV/ (略) 性腹泻病毒/非洲猪瘟/JEV/BB/牛疱疹病毒Ⅰ型/炭疽杆菌/弓形虫/钩端螺旋体/犬细小病毒/犬腺病毒/犬腺病毒1型/犬腺病毒2型/猫泛白细胞减少症病毒/猫疱疹病毒1型/支原体/猪应激基因PCR-RFLP DNA检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。扩增用试剂- * ℃保存；

2.敏感性 * %以上，批内及批间差异≤3%。

3.规格：≥ * 份/盒。

4.反应程序： * ℃≤2min；循环 * ℃≤5s， * ℃≤ * s，共 * 次，每次循环的第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号（报告基团“FAM”，淬灭基团“None”）。

5.反应体系为≥ * μL。

6.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为布鲁氏杆菌阳性；被检样品 * ＜Ct≤ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取DNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，则判定为阳性；被检样品Ct值＞ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

7.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：FAM荧光基团检测PRV/PRV gE/PPV/PCV1/PCV2/ (略) 性腹泻病毒/猪轮状病毒/猪传染性胃肠炎/非洲猪瘟/JEV/BB/牛疱疹病毒Ⅰ型/弓形虫/钩端螺旋体/犬细小病毒/犬细小病毒野毒株/猫泛白细胞减少症病毒/猫疱疹病毒1型/衣原体/荧光PCR DNA病毒检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。扩增用试剂- * ℃保存；

2. (略) 有PRV毒株，敏感性 * %。批内及批间差异≤3%。

3.规格：≥ * 份/盒。

4.反应程序： * ℃≤2min；循环 * ℃≤5s， * ℃≤ * s，共 * 次，每次循环的第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号（报告基团“FAM”，淬灭基团“None”）。

5.反应体系为≥ * μL。

6.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为阳性；被检样品 * ＜Ct＜ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取DNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，则判定为阳性；被检样品Ct值≥ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

7.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重核酸检测, 猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型经典株与高致病性变异株双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒, 猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲株与美洲株双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。- * ℃保存；

2.敏感性达到 * %以上。批内及批间差异≤3%。

3.规格：≥ * 份/盒。

4.反应程序： * ℃≤ * min， * ℃≤1min； * ℃≤5s， * ℃≤ * s，在每个循环第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号，共≤ * 个循环。

5.反应体系为≥ * μL。

6.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：猪圆环病毒1型和2型双重实时荧光PCR检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。扩增用试剂- * ℃保存；

2.敏感性达到 * %以上。特异性：特异性达到 * %。

3.批内及批间差异≤3%。

4.规格：≥ * 份/盒。

5.反应程序： * ℃≤2min；循环 * ℃≤5s， * ℃≤ * s，共 * 次，每次循环的第 * 步（ * ℃≤ * s）分别收集荧光信号。CV-2荧光报告基团为FAM，PCV-1为HEX，淬灭基团均为None（如果仪器没有HEX校正过，可暂时用VIC代替）。

6.反应体系为≥ * μL。

7.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品若FAM荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为PCV-2阳性；被检样品若HEX荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为PCV-1阳性；被检样品 * ＜Ct＜ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取DNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，则判定为阳性；被检样品Ct值≥ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

8.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：猪传染性胃肠炎、 (略) 性腹泻、猪轮状病毒 * 重实时荧光RT-PCR检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。- * ℃保存。

2.内控样本敏感性为 * %，综合评价敏感性 * %以上。批内及批间差异≤3%。

3.规格：≥ * 头份/盒。

4.反应程序：设置待检探针，其中PEDV荧光报告基团为FAM，TGEV荧光报告基团为HEX（如果仪器没有HEX校正过，可暂时用VIC代替），PRV-A荧光报告基团为CY5（如果仪器没有CY5校正过，可暂时用LIZ代替），淬灭基团均为None。在荧光P (略) 以下反应： * ℃≤5min， * ℃≤ * s；循环 * ℃≤5s， * ℃≤ * s，共 * 次，在每次循环第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号。

5.反应体系≥ * ul。

6.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品若FAM荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为PEDV阳性；被检样品若HEX荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为TGEV阳性；被检样品若CY5荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为PRV-A阳性；被检样品 * ＜Ct＜ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取RNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，可判定为阳性；被检样品Ct值≥ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

7.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：口蹄疫病毒NS抗体/弓形虫/狂犬病（定性/定量）/动物包虫/犬细粒棘球绦虫ELISA试剂盒

1. (略) 有偶蹄兽动物的口蹄疫病毒非结构蛋白抗体，能够鉴别口蹄疫病毒灭活疫苗免疫与自然感染的鉴别诊断等； (略) 有易感动物血清或血浆中的弓形虫IgG抗体；检测犬、猫等哺乳动物血清或血浆中抗狂犬病病毒IgG抗体；检测多种哺乳动物（牛、马、绵羊、山羊、猪等）血清或血浆中的包虫抗体；检测犬细粒棘球绦虫抗体。

2.敏感性、特异性均达到 * %以上；批内及批间差均小于3%；

3.规格： * 头份/盒；

4.2-8℃条件下保存，到用户手上有效期≥9个月；

5.结果判定：阴性对照OD * 平均值－阳性对照OD * 平均值应≥0.6；阳性对照阻断率均≥ * %；

6.阻断率（Inh%）的计算：Inh%=（阴性对照孔OD * 均值－样品孔OD * 值）/ 阴性对照孔OD * 均值× * %

7.结果判定：

猪血清样品：被检样品Inh%≥ * %，判为FMDV-NS抗体阳性；被检样品 * %≤Inh%＜ * %，判为FMDV-NS抗体可疑；被检样品Inh%＜ * %，判为FMDV-NS抗体阴性。

牛、羊以及其它动物血清样品： 被检样品Inh%≥ * %，判为FMDV-NS抗体阳性；被检样品 * %≤Inh%＜ * %，判为FMDV-NS抗体可疑；被检样品Inh%＜ * %，判为FMDV-NS抗体阴性。

 

合同包2：

品目号2-1：OIE猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）参 考实验室高致病性猪蓝耳病实时荧光RT-PCR检测试剂盒

规格：≥ * 次/盒

扩增用试剂- * ℃保存

试剂用途：猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）病毒核酸检测

无核酸提取试剂

样品要求：拭子、组织、环境样品

成立条件:阳性对照有条带，阴性对照无条带

试剂来源：OIE猪繁殖与呼吸综合征参 考实验室（需证明材料）

方法：荧光RT-PCR

保质期：到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号2-2：OIE猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）参 考实验室高致病性猪蓝耳病实时普通RT-PCR检测试剂盒

规格：≥ * 次/盒

扩增用试剂- * ℃保存

试剂用途：猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）病毒核酸检测

无核酸提取试剂

样品要求：拭子、组织、环境样品

成立条件:阳性对照有条带，阴性对照无条带

试剂来源：OIE猪繁殖与呼吸综合征参 考实验室（需证明材料）

方法：普通RT-PCR

电泳检测核酸

保质期：到用户手上有效期应≥6个月

合同包3：

品目号3-1：禽流感H7亚型实时荧光RT-PCR检测试剂盒

1.用途：用于检测禽流感病毒H7病毒核酸。

2.实验原理：荧光RT-PCR方法。

3.试剂盒要求：≥ * 次/盒

* 步法

4.灵敏度：对于感染性鸡胚尿囊液，荧光RT-PCR检测的最高稀释度为 * -8～ * -7，与鸡胚病毒分离灵敏度接近。能够检测禽肉和组织脏器中的禽流感、 (略) 疫病毒，与鸡胚病毒分离灵敏度接近

5.特异性：对于其余禽类疾病，相应试剂盒检测结果应为阴性

6.样品要求：组织、血清、拭子、细胞、环境样品等

7.其他要求

方法要求符合《 * 年国家动物疫 (略) 病学调查计划》（农医发〔 * 〕 * 号）第 * 页附件1《动物流感监测计划》中对监测判定标准作出明确要求：监测阳性个体须采用国家推荐的RT-PCR或荧光RT-PCR（含荧光定量RT-PCR）检测方法。

(略) 家符合《 (略) 办公厅关于推荐H7亚型禽流感病毒RT-PCR和荧光PCR检测试剂盒的通知》（农办医[ * ] * 号）要求。   （投标人须附该文件详细内容）

8.有效期：到用户手上有效期应≥9个月。

合同包4：

品目号4-1：禽流感病毒H5/7/9-N亚型血凝抑制试验抗原与阴、阳性血清

主要成分与含量：

抗原为灭活的H5/7/9-N亚型禽流感病毒，血凝效价≥7log2。

阳性血清为SPF鸡感染禽流感病毒H5/7/9-N亚型制备的高免血清，HI效价≥7log2。

阴性血清为SPF鸡血清。
试剂来源：国家禽流感参 考实验室（需证明材料）

性状要求：

抗原/阳性血清/阴性血清为海绵状疏松团块。

易与瓶壁脱离

加稀释液后迅速溶解。

作用与用途：用于HI试验检测禽流感病毒H5/7/9-N亚型抗体。

规格：2mL/瓶

用法与判定

1材料

1. * 孔V型( * 度)微量反应板、单道及多道微量移液器（配有吸头）、加样槽、吸管、烧杯等。

1.2PH值7. * . * mol/LPBS

1.2.1配制 * 倍PB称量2. * gNa2HPO4和0. * gNaH2PO。H2O，加蒸馏水至 * mL；

1.2.2配制1倍PBS量取 * ml * 倍PB，加入8.5gNaCl，加蒸馏水至 * mL；

1.2.3用NaOH或HCl调PH值至7.2；

1.2. * Kpa * min高压灭菌或用微孔滤膜过滤除菌。

1.2.5PBS * 经使用，于2～8℃保存不超过3周。

1.3阿氏（Alsevers）液称葡萄糖2. * g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0. * g、氯化钠0. * g，加蒸馏水至 * mL，加热溶解后调PH值至6.1， * Kpa * min高压灭菌，2～8℃保存备用。

1. * %鸡红细胞悬液采集2～3只SPF公鸡或无 (略) 疫等抗体的健康公鸡的血液与等体积阿氏液混合，用pH值7. * . * mol/LPBS液洗涤3次，每次均以 * rpm/min离心5min，洗涤后用PBS配成1%（V/V）红细胞悬液，2～8℃保存备用。

1.5抗原溶解冻干的抗原和血清均按瓶签上规格标注的量，用PBS溶解。

2　操作术式

2.1血凝（HA）试验

2.1.1在V型微量反应板中，每孔加0. * mlPBS。

2.1.2第l孔加0. * ml抗原，反复抽打3～5次混匀。

2.1.3从第1孔吸取0. * ml抗原加入第2孔，混匀后吸取0. * ml加入第3孔， (略) 对倍稀释至第 * 孔，从第 * 孔吸取0. * mL弃去。

2.1.4每孔加0. * mLPBS。

2.1.5每孔加入0. * mL1%（V/V）鸡红细胞悬液。

2.1.6将反应板在振荡器上震荡1～2分钟或轻扣反应板混合反应物，在室温（ * ～ * ℃）下静置 * ～ * 分钟或2～8℃ * ～ * 分钟。在对照孔红细胞显著呈钮扣状时判定结果。

2.1.7结果判定将反应板倾斜 * 度，观察红细胞有无泪珠状流淌，完全无泪珠样流淌( * %凝集)的最高稀释倍数为血凝效价。

2.2血凝抑制（HI）试验

2.2.1根据HA试验测定的效价，计算配制4个血凝单位(4HAU)抗原。HA效价除以4即为含4HAU抗原的稀释倍数。例如，HA效价为1: * ，则4HAU抗原的稀释倍数应是1: * （ * 除以4）。

2.2.2第1～ * 孔加入0. * mLPBS，第 * 孔加入0. * mLPBS。

2.2.3第1孔加入0. * mL血清，充分混匀后吸0. * mL于第2孔，依次对倍稀释至第 * 孔，从第 * 孔吸取0. * mL弃去。

2.2.4第1～ * 孔均加入0. * mL的4HAU抗原，在室温（ * ～ * ℃）下静置 * 分钟或2～8℃ * 分钟。

2.2.5每孔加入0. * mL1%（V/V）的鸡红细胞悬液，震荡混匀，在室温（ * ～ * ℃）下静置 * ～ * 分钟或2～8℃ * ～ * 分钟，对照红细胞将呈明显钮扣状沉于孔底。

3结果判定

以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀释倍数判为该血清的HI效价。 (略) 性对照血清的HI效价与已知效价误差不超过1个滴度，阴性对照血清效价不高于 * og2时，试验方可成立。被检血清HI效价≤ * og2判为阴性；＝ * og2判为可疑(可疑样品应重检，重检效价≥ * og2判为阳性，≤ * og2判为阴性)；≥ * og2判为阳性.

贮藏与有效期：≤- * ℃以下保存，有效期≥ * 个月。

合同包5：

品目号5-1：鸡白痢胶体金试剂盒

规格： * T/盒

原理：层析免疫分析

试剂盒组成：鸡白莉沙门氏菌抗体检测装置；稀释液； * 次性毛细管；抗凝剂管。

储存和稳定 性：

2- * ℃储存试剂盒

样本的采集和准备：

1)可采用鸡的全血、血 (略) 检测。

[全血]采集全血（不超过1.5ml)并置于试剂盒提供的抗凝管中。不立即使用的抗凝全血，可存放于2~8℃的环境下，并在 * 小时内使用。

[血清]采集全血并置于采集管中（不含抗凝剂，如肝素、EDTA、柠檬酸钠等），静置 * 分钟待血液 (略) 理并获取上清液。

[血浆]采集全血并置于抗凝管中（含抗凝剂，如肝素、EDTA、柠檬酸钠等）， (略) 理后获取上清液。

2)不能立即使用的样本（全血、血清或血浆），可在2~8℃环境下保存 * 小时。如需更长时间的保存，可在- * ℃以下 (略) 冷冻保管。使用前请先置于室温（ * ~ * ℃） (略) 理。

3)含有沉淀物的样本 (略) 理。

检测程序：

1)所有试剂盒组件须在使用前恢复至室温（ * - * ℃）。

2)去除试验装置外包装，并置于平坦干燥的平面上。

3)使用 * 次性毛细管取 * uL样本滴加至加样孔中，等待 * 分钟。

4)逐滴垂直 (略) 滴加3滴稀释液。

5)开始计时，样本将流过结果窗口。

6)反应至 * 分钟时判读结果。 * 分钟后结果视为无效。

结果判读：

1)阴性结果：结果窗口内只显示对照线（C线）。

2)阳性结果：检测线（T线）和对照线（C线）同时显示在结果窗口内提示鸡白痢沙门氏菌抗体的存在。

3)无效结果：如对照线（C线）没有出现，结果应被视为无效，样本须重测。

有效期：

到用户手上有效期应≥6个月

合同包6：

品目号6-1：口蹄疫和塞尼卡谷病毒直接扩增荧光定量RT-PCR抗原鉴别检测试剂盒

包装规格： * 头份/盒

用途：适用于对各种组织、水疱液、全血及OP液等样本中的口蹄疫和塞尼卡谷病 (略) 检测

不需要样本核酸提取纯化

试剂自带裂解液

试剂盒 (略) 理液体样品和固体样品，不需额外配备

阴、阳性对照均不需提取，直接作为模板即可

储存条件： (略) 分试剂储存于- * ℃及以下，其余试剂储存于4℃即可。

有效期：≥ * 个月。

样本要求：各种组织样本、水疱液、全血及OP液等含病毒RNA的样本。

操作步骤

样本粗提步骤

1.1固体类样本

a)向1.5mlEP管中加入5- * mg组织样本（大小约与半个绿豆相当）然后加入 * μL裂解液，并用组织研磨器充分研磨。

b)研磨结束后，继续向研磨液中加入≥ * μL裂解液，涡旋混匀。

c)混匀后，将提取物于常温下≥ * 0rpm离心≥2min，取 点击查看>> μL上清于干净的EP管中。此上清液作为 (略) 后续的qPCR检测， (略) 理现用。

1.2液体类样本：

a)水疱液、OP液等液体类样品（血液除外）可以 (略) PCR反应， (略) 理。

b)血液类样本：取 * μL血液加入到 * μL裂解液中，混匀后加入 * μL裂解液，涡旋混匀此混合液作为 (略) 后续的qPCR检测， (略) 理现用。

扩增试剂配制

体系构成组份≤3种（不含模板）

总体积≥ * μL。其中直扩RT-qPCR反应液体≥ * μL，直扩RT-qPCR酶≥2μL，直扩RT-qPCR引物≥2μL，模板≥5μL。

反应程序

步骤	温度	时间	循环数
1	* ℃	* min	1cycle
2	* ℃	3min	1cycle
3	* ℃	* sec	* cycles
	* ℃（收集荧光）	* sec

仪器检测通道选择：选择FAM和HEX通道（Reporter：FAMandHEX）检测

FAM通道检测口蹄疫；HEX通道检测塞尼卡谷

结果判定：

分析条件设置：阈值线设定于刚好超过阴性对照扩增曲线的最高点。如果阳性对照扩增曲线有明显对数扩增曲线，且Ct值≤ * ，阴性对照扩增曲线无Ct值显示， * 者均成立才可判定试验成立，否则试验无效。

如果检测样本FAM通道Ct值≤ * ，报告为口蹄疫病毒检测阳性；如果检测样本HEX通道Ct值≤ * ，报告为塞尼卡谷病毒检测阳性。

如果检测样本FAM通道 * ＜Ct值≤ * 时为口蹄疫可疑，需重 (略) 检测。若重复检测该样本Ct值≤ * ，则判为口蹄疫阳性；若重复检测Ct值＞ * ，则判为口蹄疫阴性。

如果检测样本HEX通道 * ＜Ct值≤ * 时为塞尼卡谷可疑，需重 (略) 检测。若重复检测该样本Ct值≤ * ，则判为塞尼卡谷阳性；若重复检测Ct值＞ * ，则判为塞尼卡谷阴性。

如果检测样本FAM通道的Ct值＞ * 或者无数值，则判为口蹄疫阴性；如果检测样本HEX通道的Ct值＞ * 或者无数值，则判为塞尼卡谷阴性；
试剂来源：国家口蹄疫参 考实验室（附证明材料）

品目号6-2：塞尼卡谷病毒间接ELISA抗体检测试剂盒

【规格】 * 孔×2块

用于检测猪血清中塞尼卡谷病毒（SVV）抗体

塞尼卡谷病毒抗原蛋白包被的微孔板

兔抗猪IgG-HRP工作液

间接ELISA原理

* nm测定

洗涤液浓缩≥ * 倍

阴阳性对照不要稀释

样品 * 倍稀释

底物为TMB

【操作程序】

1.取出抗原包被板，在记录表上记录样本的位置。如 (略) 分板条，则将需要的 (略) 试验，剩余的板条放在的自封袋中，并放入干燥剂，封好口后置于2–8℃保存。

2.加入 * μL没有稀释的阴性对照，每次检测加两孔。

3.加入 * μL没有稀释的阳性对照，每次检测加两孔。

4.在相应的孔中加入 * μL已稀释好的样品。

5. * ℃条件下孵育 * 分钟。

6.将各孔的液体弃入废液筒，用大约 * μL的1×洗涤液洗涤板孔，共洗涤3~5次。在最后 * 次洗涤液弃去后，将孔中残留的洗涤液在吸水纸上拍干。

7.每孔加入 * μL兔抗猪IgG-HRP工作液，封板。

8. * ℃条件下孵育 * 分钟。

9.重复步骤6。

* .每孔加入 * μL底物溶液。

* . * ℃条件下孵育 * ±1分钟。

* .每孔加入 * μL终止液。

* .于酶标仪上在 * nm波长下读取的OD值。

* .计算结果：

对照

（阴性对照）NCx	（阳性对照）PCx

实验有效性判定

PCx-NCx≥0. *	NCx≤0. *

如果实验结果不成立，有可能是实验操作失误造成的，应按 (略) 重复实验。

样品

S/P

SVV抗体的有无通过计算样品与阳性对照（S/P） (略) 计算。

* .结果判定

阴性	阳性
S/P？0. *	S/P≥0. *

【有效期】≥ * 个月

【储存】2~8℃避光保存
试剂来源：国家口蹄疫参 考实验室（附证明材料）

附件1：承诺函格式

                                     承诺函

点击查看>>点击查看>>**公司承诺在合同期内完成2次免费供应本省省 级比对实验用盲样制备，并满足如下要求：

1、所有盲样免费

2、盲样样品套数（ * - * 套）

3、（4个阳性盲样，2个阴性盲样）/套

4、每套中阳性盲样浓度不得 * 致

5、每个盲样编号不同

6、每个盲样可以完成的量≥2次，〈3次（按对应试剂盒的要求，PCR盲样应需提取）

7、每套盲样需独立包装（自封袋包装即可）

8、提供每个盲样的结果明细（有滴度的需提供滴度，阴阳性样品需提供阳性的强弱）

9、每个盲样应密封完好，不得渗漏

* 、盲样将作 (略) (略) 验收

* 、每套盲样要配 * 张说明书

* 、盲样验收等同试剂验收

5、更正（补充）后购买采购文件时间、地点、方式: (略) * 并发布；投标人应先在 (略) (略) 点击查看>> )注册会员，再通过会员账号在 (略) (略) 上公开信息系 (略) 报名及下载采购文件，否则投标将被拒绝。

6、更正（补充）后网上报名： * 日上午9： * 至 * 日下午 * ： *

7、更正（补充）后响应文件提交的截止时间： 点击查看>> * : *

8、更正（补充）后开标（询价方式：报价公开）时间（系统引用时间）及地点： 点击查看>> * : * 。 (略) 市 (略) 区建新镇杨周路 * 号1号楼 * 室

9、采购人名 称: (略) 省动物疫 (略)

     地址： (略) 市华林路 * 号

     项目负责人：饶静静，杨得胜

     联系电话： 点击查看>>

* 、代 理机构名 称： (略) 代 理有限公司

    地址： (略) 市 (略) 区建新镇杨周路 * 号1# *

    项目负责人：林龙宇

    联系电话： 点击查看>>

                                                                                                  (略) 代 理有限公司

                                                                                                                                     发布日期： * 日



1、原公告项目名 称： (略) 省动物疫 (略) * 年实验室试剂采购项目

2、原公告项目编号：[ * ]GK[TP] 点击查看>>

3、首次公告日期： * 日

4、更正（补充）事项及内容：
1、原谈判文件第 * 章第 * 大点“招标货物 * 览表”变更为：

合同包	品目	产品名 称	技术参数、规格要求	单价限价（元）
1	1	布病试管凝集诊断试剂（含阴阳性血清）	详见“招标内容及要求”。	*
2	PPR竞争ELISA	*
3	PPR套式PCR	*
4	PPRsybergreenPCR	*
5	过滤柱型病毒核酸提取试剂盒	*
6	口蹄疫A/O/C/AsiaI型抗体检测阻断快速ELISA试剂盒	*
7	* 步法液相阻断口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒	*
8	LB-ELISA口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒	*
9	O型抗体固相竞争ELISA试剂盒	*
*	可拆分板预分装核酸提取试剂盒	*
*	FMDA/O抗体快速检测试剂盒	*
*	CS/gE/gB/CRV/CDV/CPV/PPR型抗体快速检测试剂盒	*
*	PCV抗体快速检测试剂盒	*
*	电泳法检测FMD通用/Asia-I型/BVDV/牛冠状病毒/牛副流感病毒/小反刍兽疫/狂犬病病毒巢式/犬瘟热/犬猫冠状病毒/犬呼肠孤病毒/犬副流感病毒/猫杯状病毒/兔瘟RNA病毒检测试剂盒	*
*	FAM荧光基团检测FMD通用/Asia-I型/O型/A型/C型/BVDV/牛冠状病毒/牛副流感病毒/牛合胞体病毒/小反刍兽疫/小反刍兽疫病毒野毒株/狂犬病/犬瘟热/犬猫冠状病毒/犬副流感病毒/猫杯状病毒/哺乳动物呼肠孤病毒/荧光RNA病毒检测试剂盒	*
*	电泳法检测PRV/PRVgE/PPV/PCV/ (略) 性腹泻病毒/非洲猪瘟/JEV/BB/牛疱疹病毒Ⅰ型/炭疽杆菌/弓形虫/钩端螺旋体/犬细小病毒/犬腺病毒/犬腺病毒1型/犬腺病毒2型/猫泛白细胞减少症病毒/猫疱疹病毒1型/支原体/猪应激基因PCR-RFLPDNA检测试剂盒	*
*	FAM荧光基团检测PRV/PRVgE/PPV/PCV1/PCV2/ (略) 性腹泻病毒/猪轮状病毒/猪传染性胃肠炎/非洲猪瘟/JEV/BB/牛疱疹病毒Ⅰ型/弓形虫/钩端螺旋体/犬细小病毒/犬细小病毒野毒株/猫泛白细胞减少症病毒/猫疱疹病毒1型/衣原体/荧光PCRDNA病毒检测试剂盒	*
*	猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重核酸检测	*
*	猪圆环病毒1型和2型双重实时荧光PCR检测试剂盒	*
*	猪传染性胃肠炎、 (略) 性腹泻、猪轮状病毒 * 重实时荧光RT-PCR检测试剂盒	*
*	口蹄疫病毒NS抗体/弓形虫/狂犬病（定性/定量）/动物包虫/犬细粒棘球绦虫ELISA试剂盒	*
2	2-1	高兰实时荧光PCR试剂盒	详见“招标内容及要求”。	*
	2-2	高兰普通PCR试剂盒		*
3	3-1	禽流感H7亚型荧光PCR试剂盒		*
4	4-1	禽流感血凝/血凝抑制（HA/HI）血清/抗原		*
5	5-1	鸡白痢胶体金试剂盒		*
6	6-1	口蹄疫和塞尼卡谷病毒PCR		*
	6-2	塞尼卡谷病毒ELISA		*

2、原谈判文件第 * 章第 * 大点“技术和服务要求”中第 * 点“招标内容及要求”变更为：

合同包1： 

品目号1-1：布病试管凝集诊断试剂（含阴阳性血清）

1.试剂用途：诊断布鲁氏菌菌柄试管凝集试验用

2.规格： * 头份/5ml/瓶

3.保存条件:2~8℃保存

4.样本要求:血清

5.试剂原理:试管凝集

6.操作过程:比浊对照管配制：1: * 稀释抗原用等量稀释液稀释（1: * ）后，再用稀释液配制成含1: * 抗原0%、 * %、 * %、 * %、 * %的悬液。血清稀释：被检血清及阴、阳性对照血清都作 * .5、 * 、 * 、 * 、 * 倍稀释。将0.5ml1: * 稀释抗原和0.5ml各稀释度血清在小试管（直径约1cm）中分别混合，置 * ℃温箱中反应 * 小时后，取出试管， (略) 位与比 (略) 浊度比较，读取浊度结果。

7.成立条件:反应试管内浊度接近 * %1: * 抗原浊度，记录为“—”，表示无反应；接近 * %，记录为“+”，表示有接近 * %的反应；接近 * %，记录为“++”，表示有接近 * %的反应；接近 * %，记录为“+++”，表示有接近 * %的反应；接近0%，记录为“+++”，表示有接近 * %的反应。

8.结果判定:牛、鹿、骆驼等大动物血清最终稀释度（是血清稀释度的2倍数）1: * 及以上出现“++”反应判定为阳性反应，1: * 出现“++”反应判定为可疑反应，否则判为阴性反应。猪、羊、犬等中小动物1: * 及以上出现“++”反应判定为阳性反应，1: * 出现“++”反应判定为可疑反应，否则判为阴性反应。

9.试剂盒要求:稀释液：0.5%苯酚生理盐水。抗原稀释：布氏菌病试管凝集试验抗原作1: * 稀释使用。主要成分为抗原性良好的灭活布鲁氏菌菌体抗原。

保质期:到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-2：PPR竞争ELISA

1.试剂用途:监测羊群中PPRV抗体水平

2.规格: * 次/盒

3.保存条件:2-8度

4.样本要求:血清

5.试剂原理:ELISA

6.操作过程:阳性血清， * μL/孔。阴性血清， * μL/孔。2孔稀释液对照， * μL/孔。样品孔中加入稀释液和血清各 * μL/孔。 * ℃ * min。洗涤。每孔加单抗（1×）， * μL/孔。 * ℃ * min。洗涤。每孔加入底物溶液， * μL/孔。作用 * - * min。每孔中加入 * μL终止液， (略) 有的反应。 * nm的波长下测定各孔OD * nm值，计算阻断率。

7.成立条件:PB= * -（样品 * ）/对照

8.结果判定:阳性对照阻断率（PB）＞ * ，阴性对照阻断率（PB）＜ * ，试验结果有效；否则， (略) 试验。待检样品阻断率（PB）＞ * ，判为阳性。待检样品阻断率（PB）≤ * ，判为阴性。

9.保质期到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-3：PPR套式PCR

1.试剂用途:小反刍抗原检测

2.规格:≥ * 头份/盒

3.保存条件:- * °C保存

4.样本要求:扩增用试剂（采用反转录、扩增 * 步法）- * ℃保存

5.试剂原理:拭子、组织、环境样品

6.操作过程: * oC,3 (略) 反转录；然后 * oC, (略) Taq酶的激活； (略) * 个循环的PCR扩增（扩增条件为 * oC, * sec， * oC, * sec， * oC, * sec）； (略) * oC,7min的延伸。

7.成立条件:阳性对照有条带，阴性对照无条带。

8.结果判定:待测样品出现与阳性对照大小 * 致的扩增条带（大小约为 * bp），则结果判为普通RT-PCR阳性，否则结果判为普通RT-PCR阴性。

9.保质期到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-4：PPRsybergreenPCR

1.试剂用途:小反刍抗原检测

2.规格:≥ * 头份/盒

3.保存条件:- * °C保存

4.样本要求:扩增用试剂（采用反转录、扩增 * 步法）- * ℃保存

5.试剂原理:拭子、组织、环境样品

6.操作过程:商业化试剂盒纯化核酸。 * oC,3 (略) 反转录；然后 * oC, (略) Taq酶的激活； (略) * 个循环的PCR扩增（扩增条件为 * oC, * sec， * oC1min收集荧光信号，其中报告荧光为FAM，淬灭荧光为TAMRA）。

7.结果判定:阳性对照应出现特异性扩增曲线且Ct值小于 * ，阴性对照无Ct值且无特异性扩增曲线。如果待测样品的Ct值小于 * 且有特异性扩增曲线则结果判为强阳性；若Ct值大于 * 小于等于 * 且有特异性扩增曲线则判为弱阳性；若Ct值大于 * 则判为阴性。

8.试剂盒要求:不需提取试剂。

9.保质期到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-5：过滤柱型病毒核酸提取试剂盒

1.试剂用途:过滤柱型病毒核酸提取试剂盒病毒核酸提取

2.规格: * 头份/盒

3.保存条件:室温保存

4.样本要求: * μL血浆，血清，体分泌物或细胞培养物上清液

5.试剂原理:过滤柱吸附核酸。提取出的DNA或RNA可立即用于RT-PCR、PCR、ReaL-timePCR等分子生物实验。不需要苯酚/氯仿提取，也不需要用酒精沉淀

6.保质期:到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1-6：口蹄疫A/O/C/AsiaI型抗体检测阻断快速ELISA试剂盒

1.试剂用途：口蹄疫A/O/C/AsiaI型抗体检测阻断快速ELISA试剂盒本品采用酶联免疫阻断法检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫A/O/C/AsiaI型抗体，适用 (略) 口蹄疫疫苗免疫状况。

2.规格： * T×1块

3.保存条件：试剂盒2~8℃存放

4.样本要求：血清

5.试剂原理：包被板上包被口蹄疫重组蛋白，固相阻断方法

6.操作过程：相应的孔分别加入阴性、阳性对照、已稀释样品 * μL，加酶结合物 * μL， * ℃温育 * min。洗涤液洗板5次， * ℃温育 * min。加入显色液A、B各 * μL，加入终止液 * μL，酶标仪读值（ * nm）

7.成立条件：试验成立判断标准：PC＜0.2；NC＞0.5。

8.结果判定：S/N=(NC-样品)/(NC-PC)；如果S/N值＜0. * ，样品应判定为AsiaI抗体阴性；如果S/N值≥0. * ，样品应判定为AsiaI抗体阳性。如果S/N值＜0.5，样品应判定为A抗体阴性。如果S/N值≥0.5，样品应判定为A抗体阳性。如果S/N值＜0.4，样品应判定为O抗体阴性；如果S/N值≥0.4，样品应判定为O抗体阳性。

9.试剂盒要求：反应时间≤ * 分钟

* .配套要求：每块板可检测样品 * 份，浓缩洗涤液 * ×稀释，用样品稀释液 * 倍稀释待检样品，不稀释阴阳性对照

* .保质期到用户手上有效期≧9个月

 

品目号1-7： * 步法液相阻断口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒

1.试剂用途： * 步法液相阻断口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒本品采用酶联免疫阻断法检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫A/O/C/AsiaI型等抗体，适用于动物疫苗免疫抗体监测。

2.规格： * T× * 块

3.保存条件：试剂盒2~8℃存放

4.样本要求：血清

5.试剂原理：酶联免疫液相阻断法

6.操作过程：加入阴性对照 * μL、阳性对照 * μL、待检样品 * μL，进行梯度稀释；将第 * 步的液体转移到包被板，每孔 * μL，然后加入稀释后的病毒抗原各 * μL，病毒抗原对照孔单独加 * μL，振荡混匀； * ℃温育 * min；洗涤液洗板5次；加入抗体溶液 * μL/孔，酶结合物 * μL/孔； * ℃温育 * min；洗涤液洗板5次；加入混合显色液 * μL/孔； * ℃避光温育 * min；加入终止液 * μL/孔；酶标仪读值（ * nm）

7.成立条件：病毒抗原对照OD值应在2.0±1.0范围内；阳性对照抗体效价应在1: * ±1滴度以内；阴性对照抗体效价应＜1:8。

8.结果判定：抗体效价≥1: * ，判为阳性；抗体效价≤1: * ，判为阴性；抗体效价在1: * ～1: * 时，判为可疑。可疑待检样品需复测，复测抗体效价≥1: * ，判为阳性，＜1: * 判为阴性。

9.试剂盒要求：反应时间≤ * 分钟

* .配套要求：可检测样品 点击查看>> 份，浓缩洗涤液 * ×稀释

* .保质期到用户手上有效期≧9个月

 

品目号1-8：LB-ELISA口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒

1.试剂用途：LB-ELISA口蹄疫A/O/C/AsiaI等抗体检测试剂盒本品采用酶联免疫液相阻断法检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫A/O/C/AsiaI型等抗体，适合于动物疫苗免疫抗体监测

2.规格： * T× * 块

3.保存条件：试剂盒2~8℃存放

4.样本要求：血清

5.试剂原理：酶联免疫液相阻断法

6.操作过程：加入阴性对照 * μL、阳性对照 * μL、待检样品 * μL，进行梯度稀释，然后加入稀释后的病毒抗原各 * μL，病毒抗原对照孔单独加 * μL； * ℃温育2h；将第 * 步的液体转移到包被板，每孔 * μL； * ℃温育 * min；加入抗体溶液 * μL/孔； * ℃温育 * min；洗涤液洗板5次；加入混合显色液 * μL/孔； * ℃避光温育 * min；加入终止液 * μL/孔；酶标仪读值（ * nm）

7.成立条件：病毒抗原对照OD值应在2.0±1.0范围内；阳性对照抗体效价应在1: * ±1滴度以内；阴性对照抗体效价应＜1:8。

8.结果判定：抗体效价≥1: * ，判为阳性；抗体效价≤1: * ，判为阴性；抗体效价在1: * ～1: * 时，判为可疑。可疑待检样品需复测，复测抗体效价≥1: * ，判为阳性，＜1: * 判为阴性。

9.试剂盒要求：反应时间≤ * 分钟

* .配套要求：可检测样品 点击查看>> 份，浓缩洗涤液 * ×稀释

* .保质期到用户手上有效期≧9个月

 

品目号1-9：O型抗体固相竞争ELISA试剂盒

1.试剂用途：O型抗体固相竞争ELISA试剂盒检测牛、羊、猪等偶蹄动物血清中口蹄疫O型抗体

2.规格： * 孔/板×3块

3.保存条件：所有试剂保存于2~8℃

4.样本要求：血清

5.试剂原理：待检血清样本与O型酶标抗体竞争结合O型口蹄疫病毒抗原位点。将待检抗体按2倍梯度稀释后加入到相应的固相抗原孔中，随之给对应孔中加入O型口蹄疫酶标 (略) 孵育。当待检标本中抗体量越多，结合在固相上酶标板上的酶标抗体愈少，阳性反应呈色浅于阴性反应。

6.操作过程：将稀释板整体平移至包被反应板中，每孔 * μL； (略) 有反应孔加 * μL，标抗体工作液，轻轻震荡， * ℃ * 分钟。洗涤3~5次，每孔加底物溶液 * μL，于 * ℃5～ * 分钟后每孔加 * μL终止液。当稀释血清移至反应板后，再加入等量的酶标抗体工作液，此时血清的稀释度加倍，被检血清从1:8~1: * ，由于阳性对照血清已经预先做了1:8倍稀释，则变为1: * ~1: * 。

7.成立条件：竞争抗体对照至少2个孔的OD * nm值在0.9～2.5范围内；阴性对照血清抗体效价应<1:8；阳性对照抗体效价应在1: * ±1个滴度范围内。

8.结果判定：以竞争单抗对照平均OD * nm值的 * %为临界值，被检血清OD * nm值大于临界值的孔为阴性孔，小于等于临界值的孔为阳性孔。抗体效价大于或等于1: * 判为口蹄疫O型抗体阳性；小于或等于1: * 判为口蹄疫O型抗体阴性，介于两者之间为可疑。

9.试剂盒要求：浓缩洗液 * ×稀释，可 (略) 抗体效价滴度测定检测 * / * /4 (略)

* .配套要求：TMB底物

* .保质期：到用户手上有效期≧9个月

 

品目号1- * ：可拆分板预分装核酸提取试剂盒

1.用途：病毒核酸提取

2.规格: * 头份/盒

3.试剂要求：可拆分板。

4.试剂原理：磁珠法

5.保存条件:室温保存

6.保质期:到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号1- * ：FMDA/O抗体快速检测试剂盒

1.试剂用途：检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫病毒O/A型抗体

2.规格：≥ * 份/盒。

3.保存条件：2～8℃保存

4.样本要求：血清

5.试剂原理：免疫层析法检测；双抗原夹心法捕获被测样本中的病毒抗体

6.操作过程：样品 * 倍稀释，加 * uL到试剂卡中，避光静置 * 分钟后即可测量结果。

7.保质期：到用户手上有效期大于等于9个月。

 

品目号1- * ：CS/PRRS/PRV/CRV/CDV/CPV/PPR型抗体快速检测试剂盒

1.试剂用途：检测猪、牛、羊血清中的CS/PRRS/gE/gB/CRV/CDV/CPV/PPR抗体

2.规格：≥ * 份/盒。

3.保存条件：2～8℃保存

4.样本要求：血清

5.试剂原理：免疫层析法检测；双抗原夹心法捕获被测样本中的病毒抗体

6.操作过程：样品 * 倍稀释，加 * uL到试剂卡中，避光静置 * 分钟后即可测量结果。

1.保质期：到用户手上有效期大于等于9个月。

 

品目号1- * ：PCV抗体快速检测试剂盒

1.试剂用途：检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫病毒O/A型抗体

2.规格：≥ * 份/盒。

3.保存条件：2～8℃保存

4.样本要求：血清

5.试剂原理：免疫层析法检测；双抗原夹心法捕获被测样本中的病毒抗体

6.操作过程：样品 * 倍稀释，加 * uL到试剂卡中，避光静置 * 分钟后即可测量结果。

7.保质期：到用户手上有效期大于等于9个月。

 

品目号1- * ：电泳法检测PRRS/HP-PRRS/FMD通用/Asia-I型/BVDV/牛冠状病毒/牛副流感病毒/小反刍兽疫/狂犬病病毒巢式/犬瘟热/犬猫冠状病毒/犬呼肠孤病毒/犬副流感病毒/猫杯状病毒/兔瘟RNA病毒检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。扩增用试剂（采用反转录、扩增 * 步法）- * ℃保存。

2.试剂盒规格：≥ * 份/盒。

3.反应程序为： * ℃≤ * min， * ℃≤3min；循环 * ℃≤ * s， * ℃≤ * s， * ℃≤ * s，共 * 次；再 * ℃延伸 * min。

4.反应体系≥ * μL。

5.结果判定：阳性对照出现扩增带、阴性对照无带出现（引物带除外）时，实验结果成立。被检样品出现扩增带为阳性，否则为阴性。

6.有效期≥6个月。

 

品目号1- * ：FAM荧光基团检测PRRS/HP-PRRS/ HP-PRRS  JXA1-R株/PRRS 美洲株/PRRS 欧洲株/ PRRS 类NADC- * 毒株/ FMD通用/Asia-I型/O型/A型/C型/BVDV/牛冠状病毒/牛副流感病毒/牛合胞体病毒/小反刍兽疫/小反刍兽疫病毒野毒株/狂犬病/犬瘟热/犬猫冠状病毒/犬副流感病毒/猫杯状病毒/哺乳动物呼肠孤病毒/荧光RNA病毒检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。- * ℃保存； (略) 禽流感H9亚型毒株，敏感性达到 * %以上，灵敏度与鸡胚分离法接近。

2.规格：≥ * 份/盒。

3.反应程序： * ℃≤ * min， * ℃≤1min； * ℃≤5s， * ℃≤ * s，在每个循环第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号，共≤ * 个循环。（报告基团“FAM”，淬灭基团“None”）。

4.反应体系为≥ * μL。

5.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为阳性；被检样品 * ＜Ct＜ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取RNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，可判定为阳性；被检样品Ct值≥ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

6.到用户手上有效期≥9个月。 

 

品目号1- * ：电泳法检测PRV/PRV gE/PPV/PCV/ (略) 性腹泻病毒/非洲猪瘟/JEV/BB/牛疱疹病毒Ⅰ型/炭疽杆菌/弓形虫/钩端螺旋体/犬细小病毒/犬腺病毒/犬腺病毒1型/犬腺病毒2型/猫泛白细胞减少症病毒/猫疱疹病毒1型/支原体/猪应激基因PCR-RFLP DNA检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。扩增用试剂- * ℃保存；

2.敏感性 * %以上，批内及批间差异≤3%。

3.规格：≥ * 份/盒。

4.反应程序： * ℃≤2min；循环 * ℃≤5s， * ℃≤ * s，共 * 次，每次循环的第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号（报告基团“FAM”，淬灭基团“None”）。

5.反应体系为≥ * μL。

6.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为布鲁氏杆菌阳性；被检样品 * ＜Ct≤ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取DNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，则判定为阳性；被检样品Ct值＞ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

7.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：FAM荧光基团检测PRV/PRV gE/PPV/PCV1/PCV2/ (略) 性腹泻病毒/猪轮状病毒/猪传染性胃肠炎/非洲猪瘟/JEV/BB/牛疱疹病毒Ⅰ型/弓形虫/钩端螺旋体/犬细小病毒/犬细小病毒野毒株/猫泛白细胞减少症病毒/猫疱疹病毒1型/衣原体/荧光PCR DNA病毒检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。扩增用试剂- * ℃保存；

2. (略) 有PRV毒株，敏感性 * %。批内及批间差异≤3%。

3.规格：≥ * 份/盒。

4.反应程序： * ℃≤2min；循环 * ℃≤5s， * ℃≤ * s，共 * 次，每次循环的第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号（报告基团“FAM”，淬灭基团“None”）。

5.反应体系为≥ * μL。

6.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为阳性；被检样品 * ＜Ct＜ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取DNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，则判定为阳性；被检样品Ct值≥ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

7.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：猪瘟兔化弱毒疫苗与猪瘟野毒株双重核酸检测, 猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型经典株与高致病性变异株双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒, 猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲株与美洲株双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。- * ℃保存；

2.敏感性达到 * %以上。批内及批间差异≤3%。

3.规格：≥ * 份/盒。

4.反应程序： * ℃≤ * min， * ℃≤1min； * ℃≤5s， * ℃≤ * s，在每个循环第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号，共≤ * 个循环。

5.反应体系为≥ * μL。

6.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：猪圆环病毒1型和2型双重实时荧光PCR检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。扩增用试剂- * ℃保存；

2.敏感性达到 * %以上。特异性：特异性达到 * %。

3.批内及批间差异≤3%。

4.规格：≥ * 份/盒。

5.反应程序： * ℃≤2min；循环 * ℃≤5s， * ℃≤ * s，共 * 次，每次循环的第 * 步（ * ℃≤ * s）分别收集荧光信号。CV-2荧光报告基团为FAM，PCV-1为HEX，淬灭基团均为None（如果仪器没有HEX校正过，可暂时用VIC代替）。

6.反应体系为≥ * μL。

7.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品若FAM荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为PCV-2阳性；被检样品若HEX荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为PCV-1阳性；被检样品 * ＜Ct＜ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取DNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，则判定为阳性；被检样品Ct值≥ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

8.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：猪传染性胃肠炎、 (略) 性腹泻、猪轮状病毒 * 重实时荧光RT-PCR检测试剂盒

1.无核酸提取试剂。- * ℃保存。

2.内控样本敏感性为 * %，综合评价敏感性 * %以上。批内及批间差异≤3%。

3.规格：≥ * 头份/盒。

4.反应程序：设置待检探针，其中PEDV荧光报告基团为FAM，TGEV荧光报告基团为HEX（如果仪器没有HEX校正过，可暂时用VIC代替），PRV-A荧光报告基团为CY5（如果仪器没有CY5校正过，可暂时用LIZ代替），淬灭基团均为None。在荧光P (略) 以下反应： * ℃≤5min， * ℃≤ * s；循环 * ℃≤5s， * ℃≤ * s，共 * 次，在每次循环第 * 步（ * ℃≤ * s）收集荧光信号。

5.反应体系≥ * ul。

6.结果判定：阳性对照Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立；被检样品若FAM荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为PEDV阳性；被检样品若HEX荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为TGEV阳性；被检样品若CY5荧光信号Ct值≤ * 并出现特定的扩增曲线为PRV-A阳性；被检样品 * ＜Ct＜ * 并出现特定的扩增曲线，需重新取样提取RNA， (略) 结果判定，如仍是可疑，可判定为阳性；被检样品Ct值≥ * 时，超过本方法检测灵敏度范围，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应为阴性。

7.到用户手上有效期≥9个月。

 

品目号1- * ：口蹄疫病毒NS抗体/弓形虫/狂犬病（定性/定量）/动物包虫/犬细粒棘球绦虫ELISA试剂盒

1. (略) 有偶蹄兽动物的口蹄疫病毒非结构蛋白抗体，能够鉴别口蹄疫病毒灭活疫苗免疫与自然感染的鉴别诊断等； (略) 有易感动物血清或血浆中的弓形虫IgG抗体；检测犬、猫等哺乳动物血清或血浆中抗狂犬病病毒IgG抗体；检测多种哺乳动物（牛、马、绵羊、山羊、猪等）血清或血浆中的包虫抗体；检测犬细粒棘球绦虫抗体。

2.敏感性、特异性均达到 * %以上；批内及批间差均小于3%；

3.规格： * 头份/盒；

4.2-8℃条件下保存，到用户手上有效期≥9个月；

5.结果判定：阴性对照OD * 平均值－阳性对照OD * 平均值应≥0.6；阳性对照阻断率均≥ * %；

6.阻断率（Inh%）的计算：Inh%=（阴性对照孔OD * 均值－样品孔OD * 值）/ 阴性对照孔OD * 均值× * %

7.结果判定：

猪血清样品：被检样品Inh%≥ * %，判为FMDV-NS抗体阳性；被检样品 * %≤Inh%＜ * %，判为FMDV-NS抗体可疑；被检样品Inh%＜ * %，判为FMDV-NS抗体阴性。

牛、羊以及其它动物血清样品： 被检样品Inh%≥ * %，判为FMDV-NS抗体阳性；被检样品 * %≤Inh%＜ * %，判为FMDV-NS抗体可疑；被检样品Inh%＜ * %，判为FMDV-NS抗体阴性。

 

合同包2：

品目号2-1：OIE猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）参 考实验室高致病性猪蓝耳病实时荧光RT-PCR检测试剂盒

规格：≥ * 次/盒

扩增用试剂- * ℃保存

试剂用途：猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）病毒核酸检测

无核酸提取试剂

样品要求：拭子、组织、环境样品

成立条件:阳性对照有条带，阴性对照无条带

试剂来源：OIE猪繁殖与呼吸综合征参 考实验室（需证明材料）

方法：荧光RT-PCR

保质期：到用户手上有效期应≥6个月

 

品目号2-2：OIE猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）参 考实验室高致病性猪蓝耳病实时普通RT-PCR检测试剂盒

规格：≥ * 次/盒

扩增用试剂- * ℃保存

试剂用途：猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）病毒核酸检测

无核酸提取试剂

样品要求：拭子、组织、环境样品

成立条件:阳性对照有条带，阴性对照无条带

试剂来源：OIE猪繁殖与呼吸综合征参 考实验室（需证明材料）

方法：普通RT-PCR

电泳检测核酸

保质期：到用户手上有效期应≥6个月

合同包3：

品目号3-1：禽流感H7亚型实时荧光RT-PCR检测试剂盒

1.用途：用于检测禽流感病毒H7病毒核酸。

2.实验原理：荧光RT-PCR方法。

3.试剂盒要求：≥ * 次/盒

* 步法

4.灵敏度：对于感染性鸡胚尿囊液，荧光RT-PCR检测的最高稀释度为 * -8～ * -7，与鸡胚病毒分离灵敏度接近。能够检测禽肉和组织脏器中的禽流感、 (略) 疫病毒，与鸡胚病毒分离灵敏度接近

5.特异性：对于其余禽类疾病，相应试剂盒检测结果应为阴性

6.样品要求：组织、血清、拭子、细胞、环境样品等

7.其他要求

方法要求符合《 * 年国家动物疫 (略) 病学调查计划》（农医发〔 * 〕 * 号）第 * 页附件1《动物流感监测计划》中对监测判定标准作出明确要求：监测阳性个体须采用国家推荐的RT-PCR或荧光RT-PCR（含荧光定量RT-PCR）检测方法。

(略) 家符合《 (略) 办公厅关于推荐H7亚型禽流感病毒RT-PCR和荧光PCR检测试剂盒的通知》（农办医[ * ] * 号）要求。   （投标人须附该文件详细内容）

8.有效期：到用户手上有效期应≥9个月。

合同包4：

品目号4-1：禽流感病毒H5/7/9-N亚型血凝抑制试验抗原与阴、阳性血清

主要成分与含量：

抗原为灭活的H5/7/9-N亚型禽流感病毒，血凝效价≥7log2。

阳性血清为SPF鸡感染禽流感病毒H5/7/9-N亚型制备的高免血清，HI效价≥7log2。

阴性血清为SPF鸡血清。
试剂来源：国家禽流感参 考实验室（需证明材料）

性状要求：

抗原/阳性血清/阴性血清为海绵状疏松团块。

易与瓶壁脱离

加稀释液后迅速溶解。

作用与用途：用于HI试验检测禽流感病毒H5/7/9-N亚型抗体。

规格：2mL/瓶

用法与判定

1材料

1. * 孔V型( * 度)微量反应板、单道及多道微量移液器（配有吸头）、加样槽、吸管、烧杯等。

1.2PH值7. * . * mol/LPBS

1.2.1配制 * 倍PB称量2. * gNa2HPO4和0. * gNaH2PO。H2O，加蒸馏水至 * mL；

1.2.2配制1倍PBS量取 * ml * 倍PB，加入8.5gNaCl，加蒸馏水至 * mL；

1.2.3用NaOH或HCl调PH值至7.2；

1.2. * Kpa * min高压灭菌或用微孔滤膜过滤除菌。

1.2.5PBS * 经使用，于2～8℃保存不超过3周。

1.3阿氏（Alsevers）液称葡萄糖2. * g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0. * g、氯化钠0. * g，加蒸馏水至 * mL，加热溶解后调PH值至6.1， * Kpa * min高压灭菌，2～8℃保存备用。

1. * %鸡红细胞悬液采集2～3只SPF公鸡或无 (略) 疫等抗体的健康公鸡的血液与等体积阿氏液混合，用pH值7. * . * mol/LPBS液洗涤3次，每次均以 * rpm/min离心5min，洗涤后用PBS配成1%（V/V）红细胞悬液，2～8℃保存备用。

1.5抗原溶解冻干的抗原和血清均按瓶签上规格标注的量，用PBS溶解。

2　操作术式

2.1血凝（HA）试验

2.1.1在V型微量反应板中，每孔加0. * mlPBS。

2.1.2第l孔加0. * ml抗原，反复抽打3～5次混匀。

2.1.3从第1孔吸取0. * ml抗原加入第2孔，混匀后吸取0. * ml加入第3孔， (略) 对倍稀释至第 * 孔，从第 * 孔吸取0. * mL弃去。

2.1.4每孔加0. * mLPBS。

2.1.5每孔加入0. * mL1%（V/V）鸡红细胞悬液。

2.1.6将反应板在振荡器上震荡1～2分钟或轻扣反应板混合反应物，在室温（ * ～ * ℃）下静置 * ～ * 分钟或2～8℃ * ～ * 分钟。在对照孔红细胞显著呈钮扣状时判定结果。

2.1.7结果判定将反应板倾斜 * 度，观察红细胞有无泪珠状流淌，完全无泪珠样流淌( * %凝集)的最高稀释倍数为血凝效价。

2.2血凝抑制（HI）试验

2.2.1根据HA试验测定的效价，计算配制4个血凝单位(4HAU)抗原。HA效价除以4即为含4HAU抗原的稀释倍数。例如，HA效价为1: * ，则4HAU抗原的稀释倍数应是1: * （ * 除以4）。

2.2.2第1～ * 孔加入0. * mLPBS，第 * 孔加入0. * mLPBS。

2.2.3第1孔加入0. * mL血清，充分混匀后吸0. * mL于第2孔，依次对倍稀释至第 * 孔，从第 * 孔吸取0. * mL弃去。

2.2.4第1～ * 孔均加入0. * mL的4HAU抗原，在室温（ * ～ * ℃）下静置 * 分钟或2～8℃ * 分钟。

2.2.5每孔加入0. * mL1%（V/V）的鸡红细胞悬液，震荡混匀，在室温（ * ～ * ℃）下静置 * ～ * 分钟或2～8℃ * ～ * 分钟，对照红细胞将呈明显钮扣状沉于孔底。

3结果判定

以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀释倍数判为该血清的HI效价。 (略) 性对照血清的HI效价与已知效价误差不超过1个滴度，阴性对照血清效价不高于 * og2时，试验方可成立。被检血清HI效价≤ * og2判为阴性；＝ * og2判为可疑(可疑样品应重检，重检效价≥ * og2判为阳性，≤ * og2判为阴性)；≥ * og2判为阳性.

贮藏与有效期：≤- * ℃以下保存，有效期≥ * 个月。

合同包5：

品目号5-1：鸡白痢胶体金试剂盒

规格： * T/盒

原理：层析免疫分析

试剂盒组成：鸡白莉沙门氏菌抗体检测装置；稀释液； * 次性毛细管；抗凝剂管。

储存和稳定 性：

2- * ℃储存试剂盒

样本的采集和准备：

1)可采用鸡的全血、血 (略) 检测。

[全血]采集全血（不超过1.5ml)并置于试剂盒提供的抗凝管中。不立即使用的抗凝全血，可存放于2~8℃的环境下，并在 * 小时内使用。

[血清]采集全血并置于采集管中（不含抗凝剂，如肝素、EDTA、柠檬酸钠等），静置 * 分钟待血液 (略) 理并获取上清液。

[血浆]采集全血并置于抗凝管中（含抗凝剂，如肝素、EDTA、柠檬酸钠等）， (略) 理后获取上清液。

2)不能立即使用的样本（全血、血清或血浆），可在2~8℃环境下保存 * 小时。如需更长时间的保存，可在- * ℃以下 (略) 冷冻保管。使用前请先置于室温（ * ~ * ℃） (略) 理。

3)含有沉淀物的样本 (略) 理。

检测程序：

1)所有试剂盒组件须在使用前恢复至室温（ * - * ℃）。

2)去除试验装置外包装，并置于平坦干燥的平面上。

3)使用 * 次性毛细管取 * uL样本滴加至加样孔中，等待 * 分钟。

4)逐滴垂直 (略) 滴加3滴稀释液。

5)开始计时，样本将流过结果窗口。

6)反应至 * 分钟时判读结果。 * 分钟后结果视为无效。

结果判读：

1)阴性结果：结果窗口内只显示对照线（C线）。

2)阳性结果：检测线（T线）和对照线（C线）同时显示在结果窗口内提示鸡白痢沙门氏菌抗体的存在。

3)无效结果：如对照线（C线）没有出现，结果应被视为无效，样本须重测。

有效期：

到用户手上有效期应≥6个月

合同包6：

品目号6-1：口蹄疫和塞尼卡谷病毒直接扩增荧光定量RT-PCR抗原鉴别检测试剂盒

包装规格： * 头份/盒

用途：适用于对各种组织、水疱液、全血及OP液等样本中的口蹄疫和塞尼卡谷病 (略) 检测

不需要样本核酸提取纯化

试剂自带裂解液

试剂盒 (略) 理液体样品和固体样品，不需额外配备

阴、阳性对照均不需提取，直接作为模板即可

储存条件： (略) 分试剂储存于- * ℃及以下，其余试剂储存于4℃即可。

有效期：≥ * 个月。

样本要求：各种组织样本、水疱液、全血及OP液等含病毒RNA的样本。

操作步骤

样本粗提步骤

1.1固体类样本

a)向1.5mlEP管中加入5- * mg组织样本（大小约与半个绿豆相当）然后加入 * μL裂解液，并用组织研磨器充分研磨。

b)研磨结束后，继续向研磨液中加入≥ * μL裂解液，涡旋混匀。

c)混匀后，将提取物于常温下≥ * 0rpm离心≥2min，取 点击查看>> μL上清于干净的EP管中。此上清液作为 (略) 后续的qPCR检测， (略) 理现用。

1.2液体类样本：

a)水疱液、OP液等液体类样品（血液除外）可以 (略) PCR反应， (略) 理。

b)血液类样本：取 * μL血液加入到 * μL裂解液中，混匀后加入 * μL裂解液，涡旋混匀此混合液作为 (略) 后续的qPCR检测， (略) 理现用。

扩增试剂配制

体系构成组份≤3种（不含模板）

总体积≥ * μL。其中直扩RT-qPCR反应液体≥ * μL，直扩RT-qPCR酶≥2μL，直扩RT-qPCR引物≥2μL，模板≥5μL。

反应程序

步骤	温度	时间	循环数
1	* ℃	* min	1cycle
2	* ℃	3min	1cycle
3	* ℃	* sec	* cycles
	* ℃（收集荧光）	* sec

仪器检测通道选择：选择FAM和HEX通道（Reporter：FAMandHEX）检测

FAM通道检测口蹄疫；HEX通道检测塞尼卡谷

结果判定：

分析条件设置：阈值线设定于刚好超过阴性对照扩增曲线的最高点。如果阳性对照扩增曲线有明显对数扩增曲线，且Ct值≤ * ，阴性对照扩增曲线无Ct值显示， * 者均成立才可判定试验成立，否则试验无效。

如果检测样本FAM通道Ct值≤ * ，报告为口蹄疫病毒检测阳性；如果检测样本HEX通道Ct值≤ * ，报告为塞尼卡谷病毒检测阳性。

如果检测样本FAM通道 * ＜Ct值≤ * 时为口蹄疫可疑，需重 (略) 检测。若重复检测该样本Ct值≤ * ，则判为口蹄疫阳性；若重复检测Ct值＞ * ，则判为口蹄疫阴性。

如果检测样本HEX通道 * ＜Ct值≤ * 时为塞尼卡谷可疑，需重 (略) 检测。若重复检测该样本Ct值≤ * ，则判为塞尼卡谷阳性；若重复检测Ct值＞ * ，则判为塞尼卡谷阴性。

如果检测样本FAM通道的Ct值＞ * 或者无数值，则判为口蹄疫阴性；如果检测样本HEX通道的Ct值＞ * 或者无数值，则判为塞尼卡谷阴性；
试剂来源：国家口蹄疫参 考实验室（附证明材料）

品目号6-2：塞尼卡谷病毒间接ELISA抗体检测试剂盒

【规格】 * 孔×2块

用于检测猪血清中塞尼卡谷病毒（SVV）抗体

塞尼卡谷病毒抗原蛋白包被的微孔板

兔抗猪IgG-HRP工作液

间接ELISA原理

* nm测定

洗涤液浓缩≥ * 倍

阴阳性对照不要稀释

样品 * 倍稀释

底物为TMB

【操作程序】

1.取出抗原包被板，在记录表上记录样本的位置。如 (略) 分板条，则将需要的 (略) 试验，剩余的板条放在的自封袋中，并放入干燥剂，封好口后置于2–8℃保存。

2.加入 * μL没有稀释的阴性对照，每次检测加两孔。

3.加入 * μL没有稀释的阳性对照，每次检测加两孔。

4.在相应的孔中加入 * μL已稀释好的样品。

5. * ℃条件下孵育 * 分钟。

6.将各孔的液体弃入废液筒，用大约 * μL的1×洗涤液洗涤板孔，共洗涤3~5次。在最后 * 次洗涤液弃去后，将孔中残留的洗涤液在吸水纸上拍干。

7.每孔加入 * μL兔抗猪IgG-HRP工作液，封板。

8. * ℃条件下孵育 * 分钟。

9.重复步骤6。

* .每孔加入 * μL底物溶液。

* . * ℃条件下孵育 * ±1分钟。

* .每孔加入 * μL终止液。

* .于酶标仪上在 * nm波长下读取的OD值。

* .计算结果：

对照

（阴性对照）NCx	（阳性对照）PCx

实验有效性判定

PCx-NCx≥0. *	NCx≤0. *

如果实验结果不成立，有可能是实验操作失误造成的，应按 (略) 重复实验。

样品

S/P

SVV抗体的有无通过计算样品与阳性对照（S/P） (略) 计算。

* .结果判定

阴性	阳性
S/P？0. *	S/P≥0. *

【有效期】≥ * 个月

【储存】2~8℃避光保存
试剂来源：国家口蹄疫参 考实验室（附证明材料）

附件1：承诺函格式

                                     承诺函

点击查看>>点击查看>>**公司承诺在合同期内完成2次免费供应本省省 级比对实验用盲样制备，并满足如下要求：

1、所有盲样免费

2、盲样样品套数（ * - * 套）

3、（4个阳性盲样，2个阴性盲样）/套

4、每套中阳性盲样浓度不得 * 致

5、每个盲样编号不同

6、每个盲样可以完成的量≥2次，〈3次（按对应试剂盒的要求，PCR盲样应需提取）

7、每套盲样需独立包装（自封袋包装即可）

8、提供每个盲样的结果明细（有滴度的需提供滴度，阴阳性样品需提供阳性的强弱）

9、每个盲样应密封完好，不得渗漏

* 、盲样将作 (略) (略) 验收

* 、每套盲样要配 * 张说明书

* 、盲样验收等同试剂验收

5、更正（补充）后购买采购文件时间、地点、方式: (略) * 并发布；投标人应先在 (略) (略) 点击查看>> )注册会员，再通过会员账号在 (略) (略) 上公开信息系 (略) 报名及下载采购文件，否则投标将被拒绝。

6、更正（补充）后网上报名： * 日上午9： * 至 * 日下午 * ： *

7、更正（补充）后响应文件提交的截止时间： 点击查看>> * : *

8、更正（补充）后开标（询价方式：报价公开）时间（系统引用时间）及地点： 点击查看>> * : * 。 (略) 市 (略) 区建新镇杨周路 * 号1号楼 * 室

9、采购人名 称: (略) 省动物疫 (略)

     地址： (略) 市华林路 * 号

     项目负责人：饶静静，杨得胜

     联系电话： 点击查看>>

* 、代 理机构名 称： (略) 代 理有限公司

    地址： (略) 市 (略) 区建新镇杨周路 * 号1# *

    项目负责人：林龙宇

    联系电话： 点击查看>>

                                                                                                  (略) 代 理有限公司

                                                                                                                                     发布日期： * 日

116