依照《深圳经济特区政府采购条例》第二十一条第（四）项规定情形，深圳市质量安全检验研究院申请双酚A及其替代物致雌性受体缺陷鼠生殖毒性及机理研究采购项目采用单一来源采购，现将有关情况向社会公众征求意见:

采购编号：******

采购项目名称：双酚A及其替代物致雌性受体缺陷鼠生殖毒性及机理研究

项目预算金额： ******元

采购项目描述：(内容、用途、数量、技术参数、需求方案等)

一、项目概况

深圳市科技创新委员会2021年面上项目《双酚A及其替代物的生殖毒性及其毒理机制研究》（项目编号：JCYJ202*****135******）将系统地研究BPA及其替代物的生殖毒性，阐明雌激素受体（ER）相关的信号通路对BPA及其替代物所致生殖毒性的靶向调控作用，为筛选BPA安全替代物，制定双酚类化学品的食品安全限量标准提供毒理学基础，为建立BPA及其替代物的污染风险预警和综合防控技术体系提供理论依据。本研究将完成BPA及其替代物致雌性受体缺陷鼠生殖毒性及机理研究中BPA及其替代物致ER-/-鼠急性毒性实验、生殖器官损伤及激素水平变化评估、阐明ER靶向调控的相关信号通路在BPA及其替代物引起的生殖毒性中的作用机制等研究内容。

二、项目管理和服务要求

1.主要技术要求

1.1 主要研究内容：1）雌激素受体敲除转基因小鼠的评价、分组饲养及样品采集；2）BPA及其替代物的生殖毒性及评估，包括BPA, BPS, BPF, BPAF等双酚类物质的毒性；3）实验动物生殖器官损伤研究及激素水平变化评估，从机体，器官，组织，细胞以及分子角度阐明ER靶向调控的相关信号通路在BPA及其替代物引起的生殖毒性中的作用机制。

1.2 研究方案

实验一、不同浓度BPA及其替代物对雌激素受体缺陷型-雄性小鼠生殖毒性评估

1)动物实验

选取性成熟的体重相近的WT、ERα-/-和ERβ-/-雄性小鼠，随机分组，给雄鼠每天皮下注射不同浓度的双酚类化合物，并设置阴性和阳性对照。记录给药期间雄鼠的一般状况、重量、摄食量和交配情况，收集血液及生殖系统组织样品。

2)雄性小鼠生精能力及标志酶的检测

应用显微镜观察精子数量、精子畸形率，测定精子运动能力及睾丸标志酶（酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、山梨醇脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)）活性。

3)雄性小鼠生殖能力及子代小鼠生殖损伤的检测

检测雄性小鼠生殖能力及子代小鼠生殖系统重量及形态和病理组织变化观察，检测子代小鼠血清中黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)的含量。

实验二、ER在BPA及其替代物引起的生殖毒性中的作用机制研究

1)BPA及其替代物处理后ER分布及表达量检测

采用时荧光定量PCR法和免疫印迹法分析不同处理下各生殖系统中ER的表达量变化。

2)BPA及其替代物处理后ER相关信号通路的筛选

通过转录组、蛋白组，以及蛋白质免疫共沉淀技术，鉴定出BPA及其替代物处理后与ER互作的蛋白，应用生物信息学技术筛选出与ER相关的信号通路。

2.服务要求：投标人必须承担项目研究报告所需要的场地、耗材及人工费用等其他类似的义务。

3. 验收要求

1)整理和汇总研究成果，形成双酚A及其替代物致雌性受体缺陷鼠生殖毒性及机理研究报告1份。

2)发表学术文章1篇。

3)实验工作记录及相关数据整理汇编材料1份。

拟定供应商名单：南京农业大学

申请理由及相关说明：

一、南京农业大学是国家“211工程”重点建设大学、“985优势学科创新平台”和“双一流”一流学科建设高校，已经掌握了液相色谱质谱分析、流式细胞术、激光共聚焦技术、基因与蛋白操作、组织切片制备、实时定量PCR以及细胞信号通路分析等生物独立研究中所需的关键技术与方法。该团队是专门从事环境毒素毒理评价的研究团队，已成功构建了雌激素受体缺失转基因小鼠，并用此生物材料成功开展了多项研究，多次承担了国家、江苏省重点科研项目，科研硕果累累、行业经验丰富，且与本院在食品安全毒理学研究领域有着良好的合作基础，并取得了良好的合作成果，共已合作发表5篇SCI文献。

二、本研究是我院重点实验室研究项目“ER介导双酚S雄性生殖毒性的分子机制研究”的延伸研究，涉及实验设计的优化、实验对照组的异同、检测方法的一致性等相关工作，原研究团队才能确保各项工作顺利开展进行。

基于上述原因，此次委托业务采用单一来源采购。

征求意见期限：从2022年7月1日起至2022年7月7日止

联系方式：

采购部门:深圳市质量安全检验检测研究院畜禽产品和兽药饲料检测部

地址：深圳市南山区西丽茶光路1085号8楼

联系人：吴雯娟 联系电话：********

采购主管部门：深圳市质量安全检验检测研究院计划财务部

联系电话：********