抗Kaiso蛋白抗体在制备早期强直性脊柱炎诊断试剂盒中的应用

抗Kaiso蛋白抗体在制备早期强直性脊柱炎诊断试剂盒中的应用

  • 标的基本情况
    项目名称 抗Kaiso蛋白抗体在制备早期强直性脊柱炎诊断试剂盒中的应用 项目编号 Z********
    项目类型 技术转让
    挂牌起始日 2023-08-15 挂牌截止日 2023-08-29
    是否为技术成果组合 技术成果数量 1
    标的名称 抗Kaiso蛋白抗体在制备早期强直性脊柱炎诊断试剂盒中的应用
    技术领域 生物、医药和医疗器械
    标的权证类型 专利
    权证编号 序号 名称 权证编号 开发完成日期 首次发表日期 失效日
    1 抗Kaiso蛋白抗体在制备早期强直性脊柱炎诊断试剂盒中的应用 ZL201*****2491.7 2018-02-05 2020-10-09 2038-02-05
    获得资助情况
    (国家计划课题等)
    获得一项国家自然科学基金资助(********
    项目阶段 试生产
    技术成熟度(TRL) TRL7 完成在高逼真运行环境下的系统原型演示验证。
    样品/样机
    是否有试用报告
    项目简介

    应用场景:强直性脊柱炎的早期诊断。

    技术难度:该发明专利通过Huprot蛋白芯片筛选出Kaiso自身抗体这一血清学生物标志物,并通过MSD及免疫组化技术进行血清及组织等大样本、多方式验证。该发明专利利用MSD(Meso Scale Discovery,超敏多因子电化学发光分析仪)技术进行诊断试剂盒的开发,MSD技术是替代ELISA,Western Blot,多蛋白因子检测的第三代免疫分析技术,具有更高的灵敏度和更大通量。

    创新性:目前强直性脊柱炎的早期诊断主要依靠各类评分,主观性强,特异性敏感性低。本发明专利首次发现抗Kaiso蛋白抗体在AS患者中的诊断价值,首次提出抗Kaiso蛋白抗体检测试剂盒以及该类试剂盒在AS血清学诊断中的应用。本发明提供Kaiso自身抗体检测的MSD检测试剂盒和检测方法,提供了MSD检测高信号值、低背景的实验条件,对于早期强直性脊柱炎具有较高的诊断价值。


    技术效果与指标 早期强直性脊柱炎患者血清内抗Kaiso自身抗体水平显著高于其他对照组。它可以将早期强直性脊柱炎与晚期强直性脊柱炎、健康对照和类风湿性关节炎区分开来。早期AS患者血清内抗Kaiso自身抗体水平进展到晚期时降低。在所有中轴型脊柱关节病患者中,血清抗Kaiso自身抗体水平与C反应蛋白水平和强直性脊柱炎疾病活动指数评分呈正相关,与疾病持续时间呈负相关。 一、抗Kaiso自身抗体MSD检测试剂盒的开发及优化 采用MSD技术开发相应的自身抗体检测试剂盒。用于检测血清内自身抗体的含量时,实验原理是利用夹心法,将重组蛋白包被在板底,然后加入含有待测抗体的血清样本,或阳性对照抗体,进行孵育,再加入带有sulfo-tag标记的,抗待测抗体的二抗,最终利用电化学发光原理检测, 1.试剂,MSD专用96孔板(L15XA-3,MSD);MSD检测仪(SQ120,MSD); BlockerA(R92TC-3,MSD) ;4×Read buffer(R93BA-4,MSD); Kaiso重组蛋白(ab******,Abcam);抗Kaiso一抗(ab*****,Abcam);二抗:SULFO-TAG Anti-Mouse Antibody (Goat,R32AC-5,MSD);SULFO-TAG Anti-Human Antibody (Goat,R32AJ-5,MSD)。 2.实验,开发该自身抗体检测试剂盒需摸索条件包括重组蛋白包被浓度及包被量;血清样本稀释浓度;阳性对照抗体浓度点设置;带有sulfo-tag标记的,抗待测抗体的二抗浓度点设置等。最后摸索出高信号值,低背景的实验条件。 (1)包被相应浓度的重组蛋白,室温孵育半小时后,转移至4℃过夜; (2)第二天从冰箱取出,室温继续孵育半小时后,用5%BlockerA-PBS,室温封闭2小时; (3)用0.05%PBS-Tween20,150ul/孔,洗涤三次; (4)加入用PBS稀释好的样品和标准品,50ul/孔,室温摇床孵育2小时; (5)用0.05%PBS-Tween20,150ul/孔,洗涤三次; (6)加入用1%BlockerA-PBS稀释后的相应种属的检测抗体,室温摇床孵育2小时; (7)用0.05%PBS-Tween20,150ul/孔,洗涤三次,加入2×read buffer,150ul/孔; (8)上机检测。 3.结果,Kaiso重组蛋白包被浓度为5ug/mlKaiso, 40ul/孔;血清稀释浓度为250倍;二抗浓度为1ug/ml;在以上条件下获得的信号值高且背景低。阳性对照抗体浓度点设置为2,500, 625, 156.25, 39.06, 9.77, 2.44, 0.61, 0 ng/ml。根据以上阳性对照抗体浓度梯度获得标准曲线。 二、抗Kaiso自身抗体对早期强直性脊柱炎病人的诊断价值 为了进一步验证蛋白芯片筛选的结果,采用抗Kaiso自身抗体MSD检测试剂盒对早期AS患者、晚期AS患者、类风湿关节炎患者以及正常人血清进行抗Kaiso自身抗体的检测。晚期AS病人诊断标准是广泛的脊柱或髋关节钙化、强直。RA诊断标准是符合2010年美国风湿病学会诊断标准。 1.实验过程同前 2.结果 抗Kaiso自身抗体在早期AS病人血清中的表达量显著高于其他对照组 (p<0.05)。应用ROC曲线分析血清抗Kaiso自身抗体的诊断价值。 血清抗Kaiso自身抗体水平可以区分脊柱关节病患者(早期和晚期AS)和正常人对照组,AUC为0.74、cut-off值4065.49 ng/ml,敏感性61.1%,特异性84.4%。 血清抗Kaiso自身抗体区分早期AS与正常对照组,AUC为0.88、cut-off值4263.57 ng/ml,敏感性80%,特异性87%。 血清抗Kaiso自身抗体区分早期AS和晚期AS的AUC为0.86, cut-off值4574.98ng/ml,敏感性76%,特异性87.5%。
    技术推广及应用前景效益(风险和效益) 经济、社会价值:调查显示我国AS 患病率约为 0.3%,目前对于强直性脊柱炎的诊断往往在症状出现后8-10年,临床上较难做到早期诊断。且该病好发于青壮年男性,疾病治疗预后较差,晚期患者完全丧失生活和工作的能力,因此给患者家庭及社会带来极大负担。本发明为强直性脊柱炎早期诊断提供了一种敏感性特异性较好的方法和指标,对于早期诊断和治疗强直性脊柱炎,评估强直性脊柱炎病情具有重要作用。医院及体检中心可采购此试剂盒对慢性腰痛病人及疑是强直性脊柱炎患者进行筛查。 竞品情况:市场上暂无类似竞品。 预期产品上市后成果转化收益:约 1000万元
    技术评估内容
    技术团队名称 海军军医大学第一附属医院关节骨病外科
    技术团队人数 10-50人
    技术团队简介 海军军医大学附属长海医院关节骨病外科是以关节置换、运动及战训损伤医学和骨骼肌肉系统自身免疫性疾病三大专业为特色的国家级重点学科。在学科带头人徐卫东教授的带领下,全面开展了骨关节病人工关节置换、运动及战训损伤关节镜下微创修复、骨骼肌肉系统自身免疫性疾病内外科治疗等先进治疗技术。每年完成人工髋膝关节置换、膝肩踝关节镜等手术2000余例。尤其在战训及运动损伤发病机制及防治与康复、强直性脊柱炎的发病机制及关节功能重建、人工髋关节置换系列新技术、最新趋势的保留后叉韧带人工膝关节置换应用与推广、膝关节(半月板及交叉韧带损伤)与肩关节(肩部疼痛、肩袖撕裂和不稳脱位)等综合治疗与重返训练运动等方面,锚住军民融合创新技术,提高部队战斗力,为百姓及运动员患者解除伤痛。
    技术负责人姓名 徐卫东
    技术团队负责人(附简历) 徐卫东 科室主任、党支部书记、院党委委员 教授、主任医师、博士生导师(骨外科及运动医学两个二级学科) 海军军医大学附属长海医院关节骨病外科 上海领军人才 中央军委保健委员会会诊专家 全军首席科学家 上海市医学会运动医学分会前主委 中国医师协会首届运动医学医师分会副会长 解放军总后勤部爱军精武标兵 1996年从原第二军医大学骨外科博士毕业,专业从事关节外科、运动医学、骨骼肌肉系统自身免疫疾病,临床实践经验丰富、理论体系深厚扎实。工作敬业、作风稳健。牵头修订国务院学位办关于国家运动医学二级学科设置和人才培养大纲。牵头起草上海市人工关节及关节镜培训基地考核标准和人才培养大纲。牵头负责全军重大及重点军事研究项目各1项、以项目申请人获4项国家自然基金面上项目。以第一作者或通讯作者在国际上发表论文50余篇及中文核心期刊论文百余篇,主编/主译出版人工髋膝关节置换、膝关节半月板修复、膝关节交叉韧带重建及肩部伤病诊治及微创关节镜治疗等临床著作和教材21部。每年主办长海医院手术示教参访培训班10余期,为国内关节外科及运动医学领军型专家。
    法律意见
    重要信息披露
    是否为职务发明创造
    是否存在共有情况
    其他披露内容 本项目涉及的技术的所有权人为上海长海医院。上海长海医院已授权委托中国融通科学研究院集团有限公司(以下简称融通科研院)代为处置本项目专利技术,参与交易洽谈,并签订技术交易合同等事项。
  • 转让方简况
    转让方类型 法人
    基本情况 法人名称 中国融通科学研究院集团有限公司
    注册地(地址) 北京市海淀区复兴路乙63号1号楼3层
    注册资本(万元) ******.******
    企业类型 全民所有制企业
  • 交易条件与受让方资格条件
    交易类型 转让
    转让交易条件 交易金额 交易入门费/交易底价(万元) 200.00
    是否包含产品销售分成
    产品销售分成说明
    产品销售额提成费: 1.计取金额:受让方年度审计报告相关产品销售额的2%; 2.计取时间:不少于专利有效期内,或产品上市后不少于5年;支付方式为每年支付。
    结算方式 场外结算
    价款支付方式 分期付款
    付款要求
    本项目专利转让费用,包括入门费和提成费两个部分。 一、入门费 1.入门费为人民币200万元,采用分期付款方式,首付款不少于100万元,受让方应在技术交易合同生效之日起7个工作日内支付至转让方指定银行账户,后续交易价款受让方应依据合同约定按期支付交易价款至转让方指定银行账户; 二、提成费 1.计取金额:受让方年度审计报告相关产品销售额的2%; 2.计取时间:不少于专利有效期内,或产品上市后不少于5年;支付方式为每年支付。具体付款时间及条件以技术交易合同约定为准。
    与交易相关的其他条件
    1、本项目公告期即为尽职调查期,意向受让方在挂牌公告期间,有权利和义务自行对标的进行全面了解,一经递交受让申请即表明已完全了解与认可标的状况及相关约定,自愿接受转让标的的全部现状及瑕疵,并愿意承担一切责任与风险,成为受让方后,不得以不了解标的状况及资产质量瑕疵等为由,拒付价款,否则视为违约。 2、意向受让方在充分了解标的情况下,在项目挂牌公告期内向上海技术交易所递交受让申请并缴纳保证金,经交易所和转让方审核后,即获得竞买人资格,交易所向意向受让方出具《受让资格确认通知书》。意向受让申请材料包括但不限于:主体资格证明材料、《意向受让申请书》、内部决策文件等,以及符合受让方资格条件要求的资格证明材料。 3、意向受让方缴纳保证金后即为意向受让方对转让方做出接受交易条件并以不低于挂牌价格受让标的承诺的确认,成为标的竞买人。意向受让方逾期未交纳保证金的,视为放弃受让资格。 4、信息发布期满,如只征集到一个符合条件的意向受让方,采用协议方式转让,意向受让方应当以不低于挂牌底价的价格受让标的;如征集到两个及以上符合条件的意向受让方的,则以竞争性谈判方式组织交易,按照交易规则确定受让方和受让价格。上技所在受让方确定后60个工作日内组织交易双方签订《技术交易合同》。 5、受让方若发生以下行为即视为违约,该受让方须承担相关的全部经济责任与风险,上海技术交易所有权向受让方追偿作为对相关方的补偿:(1)以不了解技术交易标的现状、瑕疵或相关风险为由发生逾期,拒付交易价款,放弃受让,向转让方追责等情形的;(2)以转让方未尽实披露等为由发生逾期,拒付交易价款,放弃受让,向转让方追责等情形的;(3)其他扣除交易保证金的情形。 6、《技术交易合同》签订后,受让方应依据合同约定按期支付交易价款至转让方指定银行账户,交易所出具技术交易凭证,通知交易双方领取,并发布成交公告。 7、转让方应配合受让方在规定时间内完成标的权属转移变更登记事项,标的权属变更登记过程中所涉及的税费按国家法律法规相关规定由受让方自行承担。 8、受让方应按照上海技术交易所收费标准支付交易服务费。
    受让方资格条件

    1、意向受让方应为依法设立并有效存续的境内企业法人、其他经济组织或具有完全民事行为能力的自然人。 2、意向受让方须财务状况良好、有信誉、有足够的支付能力。 3、接受联合方式举牌受让,不接受委托(含隐名委托)、信托举牌受让。 4、 意向受让方应符合国家法律、法规规定的其他条件。

    保证金事项 是否交纳保证金
    交纳金额(万元) 2.******
    交纳时间 信息披露期满前交纳
    处置方式
    1、本项目信息发布公告期内(挂牌到期之日17时前),意向受让方将竞价保证金支付至上海技术交易所保证金结算账户(户名:上海技术交易所有限公司,开户行:上海浦东发展银行徐汇支行,帐号:983*****801*********),逾期无效。 2、未成交的意向受让方的交易保证金,将在受让方确定后5个工作日无息退还。受让方的交易保证金,在支付首期交易价款后5个工作日内原额原途径退还。 3.为保护交易各方合法利益,转让方在此做出特别提示,意向受让方一旦通过资格确认且交纳保证金,即成为竞买人,并对如下内容作出承诺:如竞买人存在以下任何一种情形,将承担缔约过失责任,转让方和上海技术交易所可扣除该竞买人的保证金,作为对相关方的补偿;该保证金不足以补偿的,相关方可按实际损失继续追偿。转让方同时承诺,如因转让方原因,导致项目无法正常推进或者发生其他违规违约行为时,以对竞买人设定的承诺条件承担同等损害赔偿责任。 1)只征集到一个符合条件的竞买人,在被确定为受让方后,未在60个工作日内签订《技术交易合同》的。 2)征集到两个及以上符合条件的竞买人①在组织交易过程中竞买人未提交竞买文件的;②在组织交易过程中各竞买人均未有效报价的;③竞买人被确定为受让方后,未在60个工作日内签订《技术交易合同》的。 3)违反交易保证金的有关规定或其他违规违约情形的。
  • 挂牌信息
    信息发布公告期(工作日) 10
    信息披露期满后,如未征集到意向受让方 延长信息披露:不变更信息披露内容,按照5个工作日为一个周期延长,直至征集到意向受让方。
    信息发布期满,如征集到两个及以上符合条件的意向受让方组织交易方式 竞争性谈判
    会同转让方审查意向方资格
  • 转让方承诺

    我方拟转让所持标的项目,通过上海技术交易所(以下简称“技交所”)公开披露项目信息和组织交易活动,依照公开、公平、公正和诚信的原则作如下承诺:

    (1)本次项目交易是我方真实意思表示,项目标的权属清晰,除已披露的事项外,我方对该项目拥有完全的处置权且不存在法律法规禁止或限制交易的情形;

    (2)本项目标的中所涉及的处置行为已履行了相应程序,经过有效的内部决策,并获得相应批准;交易标的涉及共有或交易标的上设置有他项权利,已获得相关权利人同意的有效文件。

    (3)我方所提交的信息发布申请及相关材料真实、完整、准确、合法、有效,不存在虚假记载、误导性陈述或重大遗漏;我方同意技交所按上述材料内容发布披露信息,并对披露内容和上述材料的真实性、完整性、准确性、合法性、有效性承担法律责任;

    (4)我方在交易过程中自愿遵守有关法律法规和技交所相关交易规则及规定,恪守信息发布公告约定,按照相关要求履行我方义务;

    (5)我方已认真考虑本次项目交易行为可能导致的企业经营、行业、市场、政策以及其他不可预计的各项风险因素,愿意自行承担可能存在的一切交易风险;

    (6)我方在技交所组织交易期间将不通过其他渠道对标的项目进行交易;

    (7)我方将按照技交所收费办法及相关交易文件的约定及时、足额支付相关费用,不因与受让方争议或合同解除、终止等原因拒绝、拖延、减少交纳或主张退还相关费用。

    我方保证遵守以上承诺,并同意技交所将相关承诺在本项目公告中披露。如违反上述承诺或有违规行为,给交易相关方及技交所造成损失的,我方愿意承担相应的赔偿责任及其他法律责任。


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  • 公示附件

联系人:郝工
电话:010-68960698
邮箱:1049263697@qq.com

标签: 诊断试剂 脊柱 抗体

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