一、采购单位：广东医科大学附属第三医院（佛山市顺德区龙江医院）
二、采购项目：《PTPRU在前列腺癌进展中早期预警及其分子机制研究》课题项
目技术外包服务
三、采购预算：200000.00元人民币（最高限价）
四、报价说明
报价要求：参与的供应商如报价超出最高限价，将被拒绝。参与的供应商必须按照要求进行报价，否则作无效处理。
报价为全包价，包括本项目的人工劳务费、试剂材料、仪器使用费、管理费用、研发成本、水电费、租赁费用、服务用具等费用以及各种税费、不可预见费及完成本采购项项目内容所需的一切费用。如果在确定供应单位后或合同履行过程中，出现任何遗漏内容需产生额外费用，均由供方自行承担，经市场调研确定价格后不得因任何因素上调，采购单位将不再支付任何其它费用。
五、供应商资格要求
1、必须是中华人民共和国境内注册并合法运作的独立法人机构，须提供营业执照副本的复印件（加盖公章）。
2、必须满足《政府采购法》第二十二条规定的条件。
3、必须建有细胞生物实验室和实时动态活细胞成像系统，有课题项目技术服务实验经验。
六、项目技术需求
本次采购项目内容为广东医科大学附属第三医院（佛山市顺德区龙江医院）的“PTPRU在前列腺癌进展中早期预警及其分子机制研究”中相关课题子项目研究内容所涉及到研究型技术服务及其研究中所有涉及到的试剂材料、仪器等。
(一)项目概况
受体型蛋白酪氨酸磷酸酶U（PTPRU）是R2B型受体蛋白磷酸酶亚家族中的一员。本研究前期通过蛋白质组学筛选并验证PTPRU在前列腺癌（PCa）细胞及组织标本中明显高表达，且与肿瘤病理恶性程度呈正相关。该项目拟进一步深入研究PTPRU在进展性PCa中的具体功能，验证PTPRU在PCa进展中分子机制，为进展性PCa的早期预警、分子靶向治疗和预后判断提供理论依据。
（二）项目研究外包服务内容：
1、前列腺癌细胞（LNCap）Kd-PTPRU shRNA-mKate-Luciferin-Puro沉默质粒体系构建和稳定株筛选；
2、前列腺癌细胞（LNCap）Over-PTPRU-mKate-Luciferin-Puro过表达质粒体系构建和稳定株筛选；
3、PTPRU非全长型对前列腺癌细胞（LNCap）细胞增殖和凋亡影响的动态观察和研究；
4、PTPRU非全长型对前列腺癌细胞（LNCap）细胞周期影响的动态观察和研究；
5、PTPRU非全长型对前列腺癌细胞（LNCap）细胞迁移（划痕）影响的动态观察和研究；
6、PTPRU非全长型对前列腺癌细胞（LNCap）细胞Transwell侵袭现象影响的观察和研究；
7、PTPRU非全长型对前列腺癌细胞（LNCap）细胞血管生成影响的动态观察和研究；
8、PTPRU非全长型对前列腺癌细胞（LNCap）细胞MAKP信号通路调控机制的研究；
9、PTPRU非全长型对前列腺癌细胞（LNCap）EMT、MMPs-TIMPs、血管生成、炎症、趋化因子影响的蛋白分子及其机制筛选；
10、PTPRU非全长型对前列腺癌细胞（LNCap）功能影响动物实验验证（裸鼠成瘤和肿瘤迁移研究）；
11、PTPRU作为前列腺癌临床诊断指标和全新激酶靶标临床样本组织芯片验证。
12、实验数据统计分析与实验数据解读报告。
（三）技术服务要求：
1、此项目中涉及到的PTPRU基因过表达或沉默稳定株构建的序列均为PTPRU非全长型基因序列；
2、构建PTPRU非全长型前列腺癌细胞（LNCap）PTPRU基因的过表达或沉默稳定株均带有mKate-Luciferin-Puro或者mCherry-Luciferin-Puro抗性和双报告基因；
★3、稳定株慢病毒感染和阳性率检测，需每小时检测一次病毒感染的感染效率、拍照实时细胞照片3个视野（白光和荧光）；连续监测48h以上病毒感染过程，形成独立实验数据库；可在任意电脑查阅和数据生成、追溯；
★4、细胞增殖、凋亡、周期、迁移研究，需在“37度+5%CO2+95%湿度”细胞培养箱环境内，通过每小时拍照一次，每次拍照3个不同视野明场和荧光下的实时细胞照片；并依据此系列照来统计和计算细胞增殖、凋亡、周期、迁移等的变化数据；生成细胞增殖、凋亡、周期、迁移曲线和变化过程Movie；连续监测增殖、凋亡、周期、迁移48h以上；形成独立实验数据库，可在任意电脑查阅和数据生成、追溯。
★5、 “细胞划痕实验”，需使用物理机械批量划痕技术，一次性划痕96个实验孔内的细胞；确保细胞划痕均一，无污染。
★6、 “血管生成”实验，需要通过实时动态活细胞成像系统，动态观察PTPRU非全长型对前列腺癌细胞（LNCap）细胞血管生成的影响；统计血管长度、面积，生成血管曲线和成管过程Movie；动态成像拍照频率每小时拍照一次，连续监测48h血管生成过程；形成独立实验数据库，可在任意电脑查阅和数据生成、追溯。
7、“蛋白分子及其机制筛选”研究中，需通过蛋白芯片等高通量筛选技术，同时检查同一份样本中，蛋白84种“EMT、MMPs-TIMPs、血管生成、炎症、趋化因子”蛋白水平的表达差异；同一份样本中，43种Phospho-Kinase表达查蛋白水平的表达差异。
8、动物实验验证（裸鼠成瘤和肿瘤迁移研究），需计算肿瘤生长曲线，需使用小动物活体观察前列腺癌细胞（LNCap）成瘤后在动物体内迁移的变化。
9、“临床样本组织芯片验证”实验，需要同时通过免疫染色，筛选100例临床样本中PTPRU蛋白水平的表达差异（定性），至少包括：2例正常人前列腺标本，90列前列腺癌标本。
★10、本项目涉及到的增殖、凋亡、周期、迁移、血管生成、Transwell实验均需设置3个重复。
★11、本项目中涉及到的所有细胞实验，均需实验前做好细胞质控，保持原始数据；包括细胞的照片、数据和原始数据。
★12、本项目中涉及到的所有，据需要提供单独的实验数据解读报告、数值、曲线、照片和原始数据。
（四）其他要求及项目说明
备注：
1、服务要求中，带★号内容为关键服务要求，投标人必须满足，否则将被视为对服务要求的非实质性响应，其投标将被拒绝。
2、以上服务内容、范围和说明描述只是概括的，不应认为是全面的、无缺的，如有缺漏项的都应包括在此次招标范围内，服务费用按实际中标金额结算，甲方不再增加支付除最低工资标准调整外的任何费用。
3、实验负责人及其团队有权全程参与实验研究，并由承接方提供相应食宿、差旅、办公用房等安排。
（五）服务期限及地点
1、本项目的服务期为壹年，自合同签订生效之日起计算，如遇不可抗拒因素可延期半年。
2、实验地点：中国境内
七、付款方式及条件
1、合同签订后，支付项目总金额的30%，作为项目启动资金；
2、项目完成过程中，分节点作为项目进度款项目并提供相应数据；
3、项目完成验收后，支付项目总金额的10%，作为项目验收款；
八、提交以下书面资料（须加盖供应商公章），一正肆副，并密封上交。
1、提供营业执照副本的复印件。
2、技术服务项目报价表。
3、技术服务响应表。
4、项目服务方案（必须有项目技术需求、其他要求及项目说明的内容等）。
5、代理人参加的，需提供授权书及身份证复印件。
九、评分方法：综合评分法。总分100分，其中商务及技术服务90分，价格10分。
十、调研公告时间：2018年12月3日。
十一、报名及递交资料截止时间：2018年12月7日（工作日上午08:30至12:00,下午14:30至17:00，）。
十二、报名及递交资料地址：佛山市顺德区龙江镇东华路39号（顺德区龙江医院门诊楼四楼B区设备物资科）
联系人：姚女士 联系电话：****-********
十三、调研会待定。
十四、监督投诉电话：********
广东医科大学附属第三医院（佛山市顺德区龙江医院）采购办
2018年12月3日

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