禽流感抗原H5（R6珠）等中标结果
禽流感抗原H5（R6珠）等中标结果
| 包号 | 采购单位 | 商品名称 | 商品品牌 | 型号及配置 | 数量 | 成交候选供应商 | 总报价 | 备注 | 最终协议单价 | 协议采购金额 | 询价起标价 |
| 1 | 连城县畜牧兽医水产局 | 禽流感抗原H5（R6珠） | 规格:2ml.1. 抗原为禽流感病毒接种SPF鸡胚培养，收获鸡胚尿囊液，经纯化、甲醛溶液灭活后，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。抗原效价不低于7Log2； 2. 试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年； 3. 试验结果阴阳性对照成立； 4. 无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。 | 8.00 | 福州安永生物技术有限公司 | 121000.00 | |||||
| 阳性血清 | 规格:2ml.1. 阳性血清系用禽流感病毒灭活疫苗接种SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成。?血凝一抑制效价不低于7Log2； 2. 试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年； 3. 试验结果阴阳性对照成立； 4. 无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。 | 8.00 | |||||||||
| 阴性血清 | 规格:1ml.SPF阴性血清 用于血清学试验阴性对照 2ml/瓶 1. SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成； 2. 试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年； 3. 试验结果阴性对照成立； 4. 无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。 | 8.00 | |||||||||
| 禽流感抗原H7N9 | 规格:2ml.1. 抗原为禽流感病毒接种SPF鸡胚培养，收获鸡胚尿囊液，经纯化、甲醛溶液灭活后，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。抗原效价不低于7Log2； 2. 试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年； 3. 试验结果阴阳性对照成立； 4. 无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。 | 8.00 | |||||||||
| 阳性血清1 | 规格:2ml.1. 阳性血清系用禽流感病毒灭活疫苗接种SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成。?血凝一抑制效价不低于7Log2； 2. 试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年； 3. 试验结果阴阳性对照成立； 4. 无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。 | 8.00 | |||||||||
| 阴性血清2 | 规格:1ml.SPF阴性血清 用于血清学试验阴性对照 2ml/瓶 1. SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成； 2. 试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年； 3. 试验结果阴性对照成立； 4. 无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。 | 8.00 | |||||||||
| 口蹄疫试剂ELISA抗体（猪） | 规格:2*96.【兽用名称】 通用名 猪O型口蹄疫病毒ELISA抗体检测试剂盒 英文名 ELISA Kit to Detect Antibody against FMD virus 汉语拼音 Zhu O xing Kou ti yi bing du ELISA kang ti jian ce shi ji he 【作用与用途】 用于检测猪血清中O型口蹄疫病毒抗体，适用于猪场口蹄疫病毒疫苗免疫状况的评价以及感染猪的血清学诊断。 【主要成分与含量】 （1） 抗原包被板（96孔/板） 2板 （2） 阴性对照血清（蓝色盖子） 1ml/管×1管 （3） 阳性对照血清（红色盖子） 1ml/管×1管 （4） 羊抗猪酶标二抗（蓝色盖子） 20ml/瓶×1瓶 （5） 样品稀释液（黄色盖子） 50ml/瓶×1瓶 （6） 底物液A（红色盖子） 10ml/瓶×1瓶 （7） 底物液B（棕色盖子） 10ml/瓶×1瓶 （8） 终止液（白色盖子） 10ml/瓶×1瓶 （9） 20倍浓缩洗涤液（白色盖子） 30ml/瓶×1瓶 （10） 血清稀释板（96孔/板） 2板 （11） 说明书 1份 【样品制备】 取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。 【洗涤液配制】 使用前，浓缩洗涤液应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解（最好在37℃水中加热5~10分钟），然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释（例如：每板用20ml浓缩液加上380ml水），稀释好的洗涤液在2~8℃可以存放7天。 【样品和对照稀释】 样品稀释：在血清稀释板中按1:32的体积稀释待检血清样品（155μl样品稀释液中加5μl待检血清样品）。 对照稀释：在血清稀释板中按1:4分别稀释阳性对照和阴性对照（180μl样品稀释液中加60μl对照血清）。 【操作步骤】 1 取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），每孔加入稀释好的洗涤液200μl，静置3分钟倒掉液体，并在吸水纸上拍干，共计洗板2次。再分别将稀释好的待检血清和对照各取100μl加入到抗原包被板孔中，待检样品做1孔，阴性对照和阳性对照各设2孔。轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37℃温育30分钟。 2 甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200μl，静置3分钟倒掉，再在吸水纸上拍干，共计洗涤5次。 3 每孔加羊抗猪酶标二抗100μl，置37℃温育30分钟。 4 洗涤5次, 方法同2。切记每次在干净吸水纸上拍干。 5 每孔先加底物液A 50?l、再加底物液B 50?l，混匀，室温(18℃~25℃)避光显色10分钟。 6 每孔加终止液50μl，10分钟内测定结果（测定前在震荡器上轻轻振动一下）。 【结果判定】 在酶标仪上测各孔的OD630nm值。试验成立的条件是阳性对照平均OD630nm值与阴性对照平均OD630nm值之差＞0.5。 按如下公式计算样品的S/P值： 样品S/P值≥0.2，判为阳性；样品S/P值＜0.2，判为阴性。 注意：用620~650纳米波长测定结果均有效。 【注意事项】 （1） 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温。使用后放回2~8℃保存。 （2） 不同批号的试剂盒组份不得混用，不同试剂使用时应防止交叉污染。 （3） 底物液和终止液不能暴露于强光或接触氧化剂。 （4） 待检血清数量较多时，应先稀释完所有待检血清，再加到抗原包被板上，使反应时间一致。 （5） 稀释20倍浓缩洗涤液时，如发现有结晶，应加热使其溶解后再使用。 （6） 移液时，应尽量准确，防止产生气泡。 （7） 应严格遵守各操作步骤规定的时间和温度。 【规格】 192孔/盒 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为10个月 | 6.00 | |||||||||
| 口蹄疫试剂ELISA抗体（牛羊O亚Ⅰ） | 规格:10*96.口蹄疫亚洲Ⅰ型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒 【规 格】 10块ELISA板，已包被兔抗亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒抗体，可检测100～200份样品。 【用 途】用于检测牛、羊和猪等偶蹄动物血清中口蹄疫亚洲Ⅰ型病毒抗体，适用于动物疫苗免疫抗体定量检测。 【贮 藏】口蹄疫亚洲Ⅰ型病毒抗原：-20℃以下保存（-40℃以下更稳定）；其余试剂盒组分放置4℃保存。 【有效期】该产品有效期为6个月。 【兽药名称】 通 用 名 口蹄疫亚洲Ⅰ型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒 【试剂盒组成】 名 称 数 量 名 称 数 量 兔抗包被ELISA板 10块 3％双氧水 1管（1ml） U型96孔抗原抗体反应板 2块 25倍PBST浓缩液 3瓶（180ml） 移液槽 5个 终止液 1瓶（60ml） 口蹄疫亚洲Ⅰ型病毒抗原 2～3瓶（15ml） 柠檬酸-磷酸盐片剂 1片 口蹄疫亚洲Ⅰ型豚鼠抗体工作液 1瓶（55ml） OPD片剂 1片 兔抗豚鼠?IgG-HRP工作液 1瓶（55ml） 封板膜 10张 口蹄疫亚洲Ⅰ型阳性对照血清 (已稀释浓度为1:8) 1管（1ml） 说明书 1份 口蹄疫阴性对照血清 1管（1ml） 【试剂工作浓度】 名 称 工作浓度 口蹄疫亚洲Ⅰ型病毒抗原 1:6 附录：试剂盒的溶液配方 磷酸－柠檬酸缓冲液（OPD稀释液） 一水柠檬酸 5.11g 无水Na2HPO4 7.3g 加无离子水至1L 或者 0.1M 柠檬酸 24.3ml 0.2M 磷酸氢二钠 25.7ml 加无离子水至 50.0ml 底物溶液加OPD 40mg/100ml 1×PBST配方 NaCl 8.0g KCl 0.2g KH2PO4 0.2g Na2HPO4 ?12H2O 2.9g Tween－20 0.5ml 加无离子水至1L，调整pH7.4 图1 96孔酶标板检测10份样品布局图 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A S1 1:8 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 +1:32 - 1:4 B 1:16 1:64 1:8 C 1:32 1:128 D 1:64 1:256 E 1:128 1:512 病毒抗原对照 F 1:256 1:1024 G 1:512 1:2048 H 1:1024 1:4096 图2 96孔酶标板检测20份样品布局图 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A S1 1:16 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 +1:32 - 1:4 B 1:32 1:64 1:8 C 1:64 1:128 D 1:128 1:256 E S11 1:16 S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 S19 S20 1:512 病毒抗原对照 F 1:32 1:1024 G 1:64 1:2048 H 1:128 1:4096 1.2加病毒抗原：将病毒抗原用1×PBST稀释至工作浓度，以50?l /孔的量加入到被检血清、阴阳性对照血清的每一稀释孔内，4孔病毒抗原对照孔仅加入100?l /孔稀释至工作浓度的病毒抗原。加入等量的病毒抗原后，血清的稀释度加倍，被检血清从1:8～1:1024，由于阳性对照血清已经预先作了8倍稀释，则变为1:32～1:4096。封板，振荡，4℃静置过夜或37℃温育90分钟。 2.将抗原抗体混合液从U型反应板上按次序转移至已包被口蹄疫 亚洲Ⅰ型兔抗的ELISA板上，50?l/孔，封板，37℃ 温育60分钟。 3.洗板5次，甩干，按50?l/孔加口蹄疫亚洲Ⅰ型豚鼠抗体工作液 （红色），封板，37℃温育30分钟。 4. 同上洗板5次，甩干，按50?l/孔加兔抗豚鼠?Ig G-HRP工作液 （蓝色），封板，37℃温育30分钟。 5. 同上洗板5次，加50?l/孔底物溶液（底物溶液务必要加双氧水（H2O2），每1ml加10?l本试剂盒配备的3%双氧水），37℃温育15分钟，每孔再加50 ?l 终止液终止反应，读取D492nm或D490nm值）。 【结果判定】 1.试验认可标准 每块板设4孔病毒抗原对照，病毒抗原对照D492nm值应在1.5±0.5范围内。阳性对照抗体效价应在1∶1024±1滴度以内，阴性对照血清抗体效价应<1:8。 2.血清抗体效价的判定 抗原对照4孔，弃去最高和最低D492nm值，计算剩余2孔的平均D492nm值，再除以2，即50%对照值，该值即为临界值，表示阻断50％反应的对照D492nm值。被检血清D492nm值大于临界值的孔为阴性孔，小于等于临界值的孔为阳性孔。若临界值与稀释倍数最高阳性孔的D492nm值相同，则以被检血清阳性孔的最高稀释倍数作为该份血清的抗体效价；若临界值处于两个稀释孔D492nm值之间，抗体效价取相邻阳性孔和阴性孔稀释倍数的反对数中间值，如处于1:64（反对数值为1.8）与1:128（反对数值为2.1）之间，则判定该份血清的抗体效价为1:90（反对数值为1.95）。 3．结果判定 抗体效价大于或等于1:128判为口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体阳性；1:64～1:128时，判为可疑；小于1:64，判定为阴性。可疑血清样品，可以重测，重测抗体效价大于或等于1:128，判为阳性，小于1:128判为阴性。 4. ELISA抗体效价与免疫动物攻毒保护的关系 牛、羊：抗体效价≥1:128，99％以上保护；效价≤1:16，不保护；效价在1:22～90之间，50％保护。 抗体效价计算对照表 抗体效价 Log10 （效价） 对照计算 抗体效价 Log10 （效价） 对照计算 抗体效价 Log10 （效价） 对照计算 1:4 0.6 1:32 1.5 1:256 2.4 1:6 0.75 1:45 1.65 1:360 2.55 1:8 0.9 1:64 1.8 1:512 2.7 1:11 1.05 1:90 1.95 1:720 2.85 1:16 1.2 1:128 2.1 1:1024 3 1:22 1.35 1:180 2.25 1:1440 3.15 【注意事项】 1. 为使您的检测获得正确结果，请您在实验前仔细阅读本说明书。 2. 兔抗包被ELISA板，打开真空包装后需尽快用完。 3. 本试剂盒配备的25倍PBST浓缩液在低温放置下，可能有无机盐结晶，用前微热溶化，1×PBST，pH值7.4。 4. 底物溶液使用前避光溶化，临用时每1 mL上述溶液加10?l 本试剂盒配备的3%的双氧水（H2O2）。底物溶液加双氧水前为无色透明液体，如出现变色，弃去不用。 5. U型稀释板可重复使用，实验结束后，用水冲洗干净，然后用无离子水沸水浴30秒，晾干，待用。 【器材准备】 1. 移液器： 0.2-10 ?l移液器、5-50?l移液器、50-200 ?l移液器、50-300 ?l 12道移液器各一把。 2. 抗原抗体反应板：微量血凝板(U型、V型均可)若干块，本试剂盒配备两块，用于被检血清的稀释和抗原抗体反应。 3. 水质要求： 无离子水或蒸馏水均可。 【试剂准备】 1. 磷酸盐-吐温缓冲液（PBST）： 使用前，将本试剂盒配备的25倍PBST浓缩液用无离子水或蒸馏水稀释成1倍PBST（1份浓缩液加入24份水进行稀释）。 2. 底物溶液配制： 取1片柠檬酸-磷酸盐片剂溶于100 mL无离子水中，溶化后，取50 mL本溶液，再加1片邻苯二胺（OPD）片剂，充分溶解，分装，避光-20℃保存。临用前务必加H2O2(每1mL底物溶液加10ul 3%H2O2)。 【操作步骤】 1．抗原抗体（阴阳性对照血清及待检血清）反应： 根据不同的需要，选择图1-2中的一种布局在抗原抗体反应板上操作。图1为抗体效价测定（定量）检测10份样品布局图；图2为抗体滴度测定（定量）检测20份样品布局图。 1．1稀释血清：以图1为例操作，在U型反应板上，以50?l /孔的量用1×PBST 2倍连续稀释血清，被检血清在第1～10列从1:4（即A1～A10孔，75?l1×PBST加25?l被检血清）稀释至1:512；在第11列稀释阳性对照血清，从1:2（即A11孔50?l1×PBST加50?l阳性对照血清）稀释至1:256；A12～B12孔稀释阴性对照血清，从1:2稀释至1:4；E12～H12孔为病毒抗原对照孔。 | 2.00 | |||||||||
| 猪瘟试剂ELISA抗体 | 规格:2*96.【兽用名称】 通用名：猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒 英文名：Blocking ELISA Kit For Classical Swine Fever Virus Antibodies Test 汉语拼音： Zhuwenbingdu Zuduan ELISA Kangtijiance Shijihe 【主要组分与含量】 （1） 抗原包被板 2块（96孔/板） （2） 阴性对照（蓝色盖子） 1管（1mL /管） （3） 阳性对照（红色盖子） 1管（1mL /管） （4） 酶标记物（蓝色盖子） 1瓶（20mL/瓶） （5） 样品稀释液 （黄色盖子） 1瓶（50ml/瓶） （6） 20倍浓缩洗涤液 （白色盖子） 1瓶（30mL/瓶） （7） 底物液A （红色盖子） 1瓶（10mL/瓶） （8） 底物液B （棕色盖子） 1瓶（10mL/瓶） （9） 终止液 （白色盖子） 1瓶（10mL/瓶） （10）血清稀释板 2板（96孔/板） （11）封板膜 2张 （12）说明书 1份 【作用与用途】适用于检测血清样品中的猪瘟病毒抗体。 【注意事项】 （1） 所有试剂用前应恢复至室温(20~25℃)，用完后返回到2~8℃以便下次使用。 （2） 请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。 （3） 没有用完的微孔板应贮存在密封塑料袋内，于2~8℃存放。 （4） 用过的材料要无害化处理，处理时遵照当地、区域以及国家法规。 （5） 避免TMB（底物液B）暴露于强光，避免接触氧化剂。 （6） 待检血清样品数量较多时，应先使用血清稀释板稀释完所有待检血清，再将稀释好的血清转移到检测板，使反应时间一致。 （7） 浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。 （8） 严格按照操作程序，仔细地吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常必要的。 【样品准备】 用样品稀释液2倍稀释待检血清和阴阳性对照（例如：60μl样品稀释液中加60μl待检血清）。 【洗涤液准备】 20倍浓缩的洗涤液使用前恢复至室温并摇匀，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释（例如：10ml的浓缩洗涤液加上190ml蒸馏水）。 【操作步骤】 （1） 取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），加稀释好的洗涤液200μl，静置1分钟倒掉，重复洗涤3次，最后一次在吸水材料上拍干。 （2） 将稀释好的待检血清、阳性对照和阴性对照各取100?l加入到抗原包被板孔中，阳性对照和阴性对照各设2孔。轻轻振匀孔中样品（勿溢出），用薄膜纸覆盖包被板，置37℃温育2小时。 （3） 掀弃薄膜纸，甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200?l，静置1分钟倒掉，重复洗涤3次，最后一次在吸水材料上拍干。 （4） 每孔加酶标记物100μl，置37℃温育30分钟。 （5） 甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200?l，静置1分钟倒掉，重复洗涤4次，最后一次在吸水材料上拍干。 （6） 每孔先加底物液A 50?l，再加底物液B 50?l，混匀，室温（20～25℃）避光显色10分钟。 （7） 每孔加终止液50?l，10分钟内测定结果（测定前轻轻振匀，勿溢出）。 【结果判定】 在酶标仪上测各孔OD630nm值，试验成立条件是阴性对照的平均OD630nm＞0.500，阳性对照的阻断率均＞50%，若试验不成立，有可能是实验操作失误造成，可重读说明书，再操作一次。 S＝样品孔OD630nm值，N＝阴性对照孔平均OD630nm值。 阻断率=(1-S/N)×100% 若被检样品的阻断率≤30%，该样品判为CSFV抗体阴性。 若被检样品的阻断率≥40%，该样品判为CSFV抗体阳性。 若被检样品的阻断率在30%~40%之间，该样品判为可疑。 【规格】 192孔/盒 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期10个月。 | 6.00 | |||||||||
| 高致病性蓝耳病ELISA抗体 | 规格:2*96.【兽用名称】 通 用 名 猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒 商 品 名 无 英 文 名 ELISA kit to Detect the Antibody against Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus 汉语拼音 Zhufanzhiyuhuxizonghezhengbingdu ELISA Kangtijiance Shijihe 【主要组分与含量】 成分 含量 （1）抗原包被板（96孔板） 2板 （2）阴性对照血清 1ml/管×1管 （3）阳性对照血清 1ml/管×1管 （4）羊抗猪酶标二抗 20ml/瓶×1瓶 （5）样品稀释液 50ml/瓶×1瓶 （6）底物液A 10ml/瓶×1瓶 （7）底物液B 10ml/瓶×1瓶 （8）终止液 10ml/瓶×1瓶 （9）20倍浓缩洗涤液 30ml/瓶×1瓶 （10）血清稀释板（96孔板） 2板 （11）说明书 1份 【作用与用途】 用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白抗体。 【用法与判定】 1 用法 1.1 样品准备 取动物全血，待血液凝固后，以4000r/min离心10分钟，收集血清；或待血液凝固后自然析出血清，再收集血清。血清应清亮，无溶血。 1.2 洗涤液配制 使用前，将20倍浓缩洗涤液恢复至室温（20～25℃），并摇动使沉淀溶解（最好在37℃水浴中加热5～10分钟），然后用蒸馏水作20倍稀释，混匀，置2～8℃保存，可保存7日。 1.3 待检血清和对照血清的稀释 将待检血清在血清稀释板中按1:40稀释（如：195μl样品稀释液中加5μl待检血清），阳性和阴性对照血清在血清稀释板中按1:4稀释（如：165μl样品稀释液中加55μl对照血清）。 1.4 操作步骤 1.4.1 取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），每孔加入稀释好的洗涤液200μl，静置3分钟，弃去洗涤液，并在吸水纸上拍干，共计洗涤2次。再将稀释好的待检血清、阴性对照血清和阳性对照血清各取100μl加至抗原包被板中，待检血清设1孔，阴性、阳性对照血清各设2孔。轻轻振匀孔中样品，置37℃温育30分钟。 1.4.2 洗涤 弃去板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200μl，静置3分钟，弃去洗涤液，并在吸水纸上拍干，重复洗板5次。 1.4.3 加入二抗 每孔加羊抗猪酶标二抗100μl，置37℃温育30分钟。 1.4.4 洗涤 方法同1.4.2。 1.4.5 显色 每孔先加入1滴底物液A （约50μl）、再加入1滴底物液B（约50μl），混匀，置室温避光显色10分钟。 1.4.6 终止反应 每孔加入1滴终止液（约50μl），混匀，10分钟内测定结果。 2 判定 在酶标仪上测各孔OD630nm值。试验成立的条件是：阳性对照孔OD630nm值均应≥1.0，且＜3.0，阴性对照孔OD630nm值均应＜0.2。计算样品的KQ值。 样品OD630nm值 阳性对照OD630nm值平均值 若KQ≥20，判为猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性；若KQ＜20，判为猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阴性。 【注意事项】 （1） 试剂盒使用前各试剂应恢复至室温，使用后放回2～8℃保存。 （2）不同批号的试剂盒组分不得混用，不同试剂使用时应防止交叉污染。 （3）底物液B和终止液不能暴露于强光或避免接触氧化剂。 （4）待检血清样品数量较多时，应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清，再将稀释好的血清转移到抗原包被板上，使反应时间一致。 （5）浓缩洗涤液用蒸馏水稀释时，如发现有结晶，应37℃水浴加热使其溶解后再使用。 （6）在操作过程中移液时，切忌将气泡加入抗原包被板孔中。 （7）应严格按照说明书各操作步骤规定的时间和温度进行操作。 【规格】 192孔/盒 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为10个月 | 6.00 | |||||||||
| 口蹄疫O型固相ELISA | 规格:10*96.【兽药名称】 通 用 名 口蹄疫O型固相竞争ELISA抗体检测试剂盒 【试剂盒组成】 （1） 酶标板（10块，已包被口蹄疫O型捕获抗体） （2） 口蹄疫O型病毒抗原（2瓶，6ml/瓶，工作浓度 待定） （3） 口蹄疫O型竞争抗体（1瓶，60ml/瓶）） （4） 酶标二抗（1瓶，60ml/瓶） （5） 口蹄疫O型阳性血清（1管，1ml/管，已稀释浓度为1:4） （6） 口蹄疫O型阴性血清（1管，1ml/管） （7） 25倍PBST浓缩液（25×PBST，2瓶，60 ml/瓶） （8） TMB底物A溶液（1瓶，30ml/瓶） （9） TMB底物B溶液（1瓶，30ml/瓶） （10） 终止液（1瓶，50ml/瓶） （11） 封板膜（10张） （12） 移液槽（5个） （13） 说明书（1份） 【试剂工作浓度】 品 名 工作浓度 口蹄疫O型病毒抗原 1: 【作用与用途】 用于检测猪、牛、羊等偶蹄动物血清中口蹄疫O型病毒抗体，适用于动物口蹄疫O型疫苗免疫抗体检测。 【器材准备】 （1） 5～50?L、0.2～10?L、50～200?L单道移液器、50～300?L 12道移液器各1把。 （2） 移液枪头若干。 【试剂准备】 PBST 将本试剂盒配备的25倍浓缩PBST（可能有结晶形成，用时微热溶化）用无离子水或蒸馏水做1∶25稀释。（如果pH值降低，务必用氢氧化钠溶液将pH值调至7.4） 【操作步骤】 （1） 从包装袋中取出已包被口蹄疫O型捕获抗体的酶标板，PBST稀释口蹄疫O型病毒抗原至使用浓度，每孔50?L加入酶标板孔，37℃孵育60分钟或4℃过夜。（已加入口蹄疫O型病毒抗原的酶标板置4℃保存，在3天内，酶标板孔内的病毒抗原液颜色不出现变化前，随时可取出使用）。 （2） 根据不同的需要，选择图1~2中的一种布局在酶标板上操作。图1为抗体滴度测定（定量）检测10份样品布局图；图2为抗体滴度测定（定量）检测20份样品布局图。以图1为例操作，用PBST连续洗酶标板3次，在吸水纸上甩干。随后，在A1-A11孔加入PBST 75?L/孔，其余被检血清孔和阳性对照孔加入PBST 50?L/孔，在A1-A11孔加入25?L/孔被检血清和阳性对照血清，从酶标板第一行至第八行连续两倍进行稀释，被检血清稀释倍数为1:4至1:512，阳性对照血清的稀释倍数为1:16至1:2048。同时在C12~D12孔间，连续两倍稀释口蹄疫阴性对照血清两孔，稀释倍数为1:2~1:4。各被检血清孔和阳性及阴性对照血清孔稀释完毕后，各孔剩余液体量均为50?L/孔。 竞争抗体工作液以50?L/孔的量加入被检血清、阴阳性对照血清的每一稀释孔内，在每一块酶标板上都要有4孔竞争抗体对照，仅仅加入100?L/孔竞争抗体工作液。振荡，封板膜封板，37℃孵育30分钟。酶标板各孔加入50?L/孔的竞争抗体后，血清的稀释度加倍（如图1所示比例）。 图1 96孔酶标板检测10份样品布局图 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A S1 1:8 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 1:32 B 1:16 1:64 C 1:32 1:128 1:4 D 1:64 1:256 1:8 E 1:128 1:512 竞争抗体 对照 F 1:256 1:1024 G 1:512 1:2048 H 1:1024 1:4096 （3） 用PBST连续洗板3次，在吸水纸上甩干，加酶标二抗工作液50?L/孔，置37℃孵育30分钟。 （4） 用PBST连续洗板3次，在吸水纸上甩干。将TMB底物A溶液和B溶液以1:1比例混匀，加底物溶液50?L/孔，置37℃孵育。15分钟后，加终止液50?L/孔，终止反应，在酶标仪上读取D450nm值。 图2 96孔酶标板检测20份样品布局图 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A S1 1:16 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 1:32 B 1:32 1:64 C 1:64 1:128 1:4 D 1:128 1:256 1:8 E S11 1:16 S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 S19 S20 1:512 竞争抗体 对照 F 1:32 1:1024 G 1:64 1:2048 H 1:128 1:4096 【结果判定】 （1） 对照的设立 每块板设口蹄疫O型竞争抗体对照4孔和口蹄疫O型阴性对照血清孔2孔，阳性对照血清孔8孔，4孔口蹄疫O型竞争抗体对照不加任何其他血清，仅仅加入100?L/孔的竞争抗体工作液。 （2） 结果判定 以竞争抗体对照平均D450nm值60%为临界值，竞争抗体对照是4孔，弃去最高和最低D450nm值，计算剩余2孔的平均D450nm值，再乘以60％，即为临界值，表示被检血清阻断40％反应的对照D450nm值。 以竞争抗体对照平均D450nm值的60%为临界值，被检血清孔D450nm值大于临界值为阴性孔，小于等于临界值为阳性孔。某份血清系列稀释中，阳性孔的最高稀释倍数为被检血清的抗体效价。若临界值处于两个稀释孔D450nm值之间，抗体效价取相邻阳性孔和阴性孔稀释倍数的对数中间值，如处于1:64（Log10的对数值为1.8）与1:128（Log10的对数值为2.1）之间，则判定该份血清的抗体效价为1:90（Log10的对数值为1.95）。 （3） 试验认可标准 竞争抗体对照至少2个孔的D450nm值大于或等于1.0；阳性对照血清抗体效价应在1∶512±1个滴度以内；阴性对照血清抗体效价应小于1:8。 （4） 血清阴阳性结果判定 抗体效价大于或等于1:128判为口蹄疫O型抗体阳性；1:64～1:128时，判为可疑；小于或者等于1:64，判为阴性。可疑血清样品，可以重测，重测抗体效价大于或等于1:128，判为阳性，小于1:128判为阴性。 （5） 抗体效价与免疫动物攻毒保护的关系 牛、羊：抗体效价不小于1:128，99%以上保护；小于1:16不保护；1:22~90，50%以上保护；猪：不小于1:64，99%以上保护；小于1:4 不保护；1:4~45，50%以上保护。 表3 抗体效价计算对照表 抗体效价 Log10（效价）对照计算 抗体效价 Log10（效价）对照计算 抗体效价 Log10（效价）对照计算 1:4 0.6 1:32 1.5 1:256 2.4 1:6 0.75 1:45 1.65 1:360 2.55 1:8 0.9 1:64 1.8 1:512 2.7 1:11 1.05 1:90 1.95 1:720 2.85 1:16 1.2 1:128 2.1 1:1024 3 1:22 1.35 1:180 2.25 1:1440 3.15 【注意事项】 1. 为使您的检测获得正确结果，请您在检测前仔细阅读本说明书； 2. 本试剂盒配备的25倍PBST浓缩液在低温放置下，可能有无机盐结晶，用前微热溶化。25倍稀释后，如pH发生变化，务必用NaOH或稀HCl溶液调pH值至7.4； 3. 口蹄疫病毒抗原为粉红色液体，低温冷冻保存，融化后颜色如发生变化，应弃去不用； 4. 底物溶液应避光贮藏，均为无色透明液体，如底物A溶液使用前出现颜色变化，应弃去不用； 5. 终止液为硫酸溶液，小心使用，防止对皮肤造成灼伤及对衣物造成损伤。 【规格】 96孔/块，10块酶标板/盒。 【贮藏与有效期】 口蹄疫ASIAⅠ型病毒抗原：-20℃以下保存；其余试剂盒组分放置2～8℃保存，有效期为6个月。 | 2.00 | |||||||||
| 伪狂犬gE抗体 | 规格:2*96.【兽用名称】 通用名：猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗体检测试剂盒 【主要成分与含量】 （1） 猪伪狂犬病毒gE蛋白ELISA抗原包被板（96孔/板） 2板 （2） 阴性对照血清 2ml/管×1管 （3） 阳性对照血清 2ml/管×1管 （4） 酶标记物 20ml/瓶×1瓶 （5） 样品稀释液 50ml/瓶×1瓶 （6） 底物液A 10ml/瓶×1瓶 （7） 底物液B 10ml/瓶×1瓶 （8） 终止液 10ml/瓶×1瓶 （9） 20倍浓缩洗涤液 30ml/瓶×1瓶 （10） 血清稀释板（96孔/板） 2板 （11） 说明书 1份 【作用与用途】 用于伪狂犬病病毒gE缺失疫苗免疫猪与自然感染猪的鉴别诊断。 【样品制备】 取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。 【洗涤液配制】 使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（20～25℃），并摇动使沉淀溶解（最好在37℃水浴锅中加热5～10分钟），然后用蒸馏水作20倍稀释（例如：30ml的浓缩洗涤液加上570ml蒸馏水），混匀，稀释好的洗涤液在2～8℃可以存放7日。 【样品和对照稀释】 样品稀释：在血清稀释板中按1:1的比例稀释（例如：100?l样品稀释液中加100?l待检血清）。 对照稀释：在血清稀释板中按1:1的比例稀释（例如：120?l样品稀释液中加120?l对照血清）。 【操作步骤】 1.取抗原包被板（根据样品多少，可拆分多次使用），分别将稀释好的待检血清样品和对照血清各取100?l加入到抗原包被板孔中。同时设2孔阴性对照、2孔阳性对照，轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37℃下孵育45分钟。 2.弃去孔中的液体，每孔加入200μl洗涤液，每次静置3分钟弃去洗涤液，并在吸水纸上拍干，共计洗板5次。 3.每孔加酶标记物100μl，置37℃下孵育20分钟。 4.洗涤5次，方法同2。 5.每孔先加底物液A 50μl、再加底物液B 50μl，混匀，室温（20~25℃）避光显色15分钟。 6.每孔加终止液50μl，混匀后10分钟内测定结果。 【结果判定】 在酶标仪上测各孔OD630nm值。试验成立的条件是阴性对照孔平均OD630nm值与阳性对照平均OD630nm值之差≥0.3。 S=样品孔OD630nm值，N=阴性对照孔平均OD630nm值。 若S/N比值≤0.35，样品判为gE抗体阳性。 若S/N比值≤0.4但＞0.35，样品判为可疑。该样品必须重测，如结果相同，则判为gE抗体阳性。 若S/N比值＞0.4，样品判为gE抗体阴性。 注意：用620~650纳米波长测定结果均有效。 【注意事项】 （1） 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温。使用后放回2~8℃保存。 （2） 不同批号的试剂盒组份不得混用，不同试剂使用时应防止交叉污染。 （3） 底物液和终止液不能暴露于强光或接触氧化剂。 （4） 待检血清样品数量较多时，应先稀释完所有待检血清，再加到抗原包被板上，使反应时间一致。 （5） 稀释20倍浓缩洗涤液时，如发现有结晶，应加热使其溶解后再使用。 （6） 移液时，应尽量准确，防止产生气泡。 （7） 应严格遵守各操作步骤规定的时间和温度。 【规格】 192孔/盒 【贮藏与有效期】 2~8℃保存，有效期为10个月。 | 2.00 | |||||||||
| 伪狂犬gB抗体 | 规格:2*96.兽用名称】 通用名：猪伪狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒 【主要成分与含量】 （1） 抗原包被板（96孔/板） 2板 （2） 阴性对照 2ml/管×1管 （3） 阳性对照 2ml/管×1管 （4） 酶标记物 20ml/瓶×1瓶 （5） 样品稀释液 50ml/瓶×1瓶 （6） 底物液A 10ml/瓶×1瓶 （7） 底物液B 10ml/瓶×1瓶 （8） 终止液 10ml/瓶×1瓶 （9） 20倍浓缩洗涤液 30ml/瓶×1瓶 （10） 血清稀释板（96孔/板） 2板 （11） 说明书 1份 【作用与用途】 适用于检测猪伪狂犬病毒特异性抗体。 【样品制备】 取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。 【洗涤液配制】 使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（20～25℃），并摇动使沉淀溶解（最好在37℃水浴锅中加热5～10分钟），然后用蒸馏水作20倍稀释（例如：30ml的浓缩洗涤液加上570ml蒸馏水），混匀，稀释好的洗涤液在2～8℃可以存放7日。 【样品和对照稀释】血清样品稀释：在血清稀释板中按1:1的体积稀释待检血清样品 （例如：100?l样品稀释液中加100?l待检血清）。 对照血清稀释：在血清稀释板中按1:1分别稀释阳性对照和阴性对照 （例如：120?l样品稀释液中加120?l阳性或阴性对照）。 【操作步骤】 1.取抗原包被板（根据样品多少，可拆分多次使用），将稀释好的待检血清样品和对照血清各取100?l加入到抗原包被板孔中。待检样品做1孔，阴性对照和阳性对照各设2孔，轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37℃下温育30分钟。 2.甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200μl，静置3分钟倒掉，再在吸水纸上拍干，共计洗涤5次。 3.每孔加酶标记物100μl，置37℃温育30分钟。 4.洗涤5次，方法同2。切记每次在干净吸水纸上拍干。 5.每孔先加底物液A 50μl、再加底物液B 50μl，混匀，室温（20℃~25℃）避光显色10分钟。 6.每孔加终止液50μl，10分钟内测定结果（测定前在振荡器上轻轻震动一下）。 【结果判定】 在酶标仪上测各孔OD630nm值。试验成立的条件是阴性对照孔平均OD630nm值与阳性对照平均OD630nm值之差≥0.4。 S=样品孔OD630nm值，N=阴性对照孔平均OD630nm值。 若S/N比值≤0.6，样品判为PRV抗体阳性。 若S/N比值≤0.7但＞0.6，该样品必须重测，如果结果相同，则过一段时间后重新从动物取样进行检测。 若S/N比值＞0.7，样品判为PRV抗体阴性。 【注意事项】 （1）试剂盒使用前各试剂应平衡至室温。使用后放回2~8℃保存。 (2）不同批号的试剂盒组份不得混用，不同试剂使用时应防止交叉污染。 （3）底物液和终止液不能暴露于强光或接触氧化剂。 （4）待检血清样品数量较多时，应先稀释完所有待检血清，再加到抗原包被板上，使反应时间一致。 （5）稀释20倍浓缩洗涤液时，如发现有结晶，应加热使其溶解后再使用。 （6）移液时，应尽量准确，防止产生气泡。 （7）应严格遵守各操作步骤规定的时间和温度。 【规格】 192孔/盒 【贮藏与有效期】 2~8℃保存，有效期10个月。 | 2.00 | |||||||||
| 小反刍兽疫抗体 | 规格;5*96.兽用名称：小反刍兽疫阻断ELISA 抗体检测试剂盒 【组分与用法】 编号 名称 装量 用法 1 抗原包被的酶标板 5 块 直接使用 2 酶标单抗（5×） 5.5mL/瓶×1 瓶 用稀释液做5 倍稀释 3 阳性血清 1.5mL /管×1 管 直接使用 4 阴性血清 1.5mL /管×1 管 直接使用 5 稀释液 55mL/瓶×1 瓶 直接使用 6 洗涤液（20×） 100mL/瓶×1 瓶 用双蒸水做20 倍稀释，按0.5‰比例加入吐温-20 7 吐温-20 1.5mL/管×1 管 直接使用 8 底物溶液 30mL/瓶×1 瓶 直接使用 9 终止液 30mL/瓶×1 瓶 直接使用 【作用与用途】 用于监测羊群中PPRV 抗体水平。 【用法与判定】 1 操作步骤 酶标板上对照和样品的分布图： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A Ｐ S3 B Ｐ S4 C Ｎ S5 D Ｎ E Cm F Cm G S1 H S2 注：P—阳性血清对照孔 N—阴性血清对照孔 Cm—酶标单抗对照孔 S1、S2、S3、S4 等—表示加待检血清孔 1) 在 A1 和B1 抗原包被孔加入阳性血清，50μL/孔。 2) 在 C1 和D1 抗原包被孔中加入阴性血清，50μL/孔。 3) 在 E1 和F1 抗原包被孔中加入稀释液，50μL/孔。 4) 在样品孔中加入稀释液，25μL/孔。 5) 在样品孔中再加入待检血清，25μL/孔。 6) 37℃孵育60min。 7) 弃去反应孔中的液体。 8) 每孔用洗涤液清洗 4 次，洗涤液（1×）300μL/孔。 9) 每次除去洗涤液后，在吸水纸上拍打，除去残留的液体。 10) 每孔加入酶标单抗（1×），50μL/孔。 11) 37℃孵育30min。 12) 重复步骤 7 至9。 13) 每孔加入底物溶液，50μL/孔。 14) 室温避光作用 10-15min。 15) 每孔中加入 50μL 终止液，终止所有的反应。 16) 用酶标仪在 450nm 的波长下测定各孔OD450nm 值，计算阻断率。 2 结果判定 1) 阳性对照阻断率（PB）＞60，阴性对照阻断率（PB）＜40，试验结果有效； 否则，应重新进行试验。 2) 待检样品阻断率（PB）＞50，判为阳性。 3) 待检样品阻断率（PB）≤50，判为阴性。 【注意事项】 1) 本试剂盒严禁冻结。 2) 所有试剂在使用前恢复至室温。 3) 试剂盒各种组分均为专用，不得交叉使用，以免污染。 4) 底物溶液避光保存，使用后立刻拧紧试剂瓶盖，并放试剂盒内。 【规格】 450 头份 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为6 个月。 | 4.00 | |||||||||
| 阳性血清3 | 规格:1ml.1. 阳性血清系用鸡新城疫灭活疫苗接种SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成。?血凝一抑制效价不低于8Log2； 2. 试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年； 3. 试验结果阴阳性对照成立； 4. 无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。 | 6.00 | |||||||||
| 阴性血清4 | 规格:1ml.SPF阴性血清 用于血清学试验阴性对照 2ml/瓶 1. SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成； 2. 试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年； 3. 试验结果阴性对照成立； 4. 无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。 | 6.00 | |||||||||
| 布病虎红平板凝集试剂 | 【兽药名称】通 用 名：布氏菌病虎红平板凝集试验抗原商 品 名：无 【主要成分及含量】含灭活的布氏菌菌株【性状】红色均匀悬浮液，久置后，上不曾清，底部有少量红色菌体沉淀。 【作用与用途】用于虎红平板凝集试验诊断布氏菌病。【用法与判定】 取被检血清 0.03ml 与抗原 0.03ml 相混合，4 分钟内观察结果。凡出现“+”以上反应者判为阳性。对出现阳性反应的动物，须进一步作补体结合试验或其他辅助诊断试验。凝集反应判定标准： ++++ 凝集块呈菌从状，凝块间液体明显清亮。 +++ 凝集反应较强，液体较清亮。 ++ 形成较明显卷边，凝集块间液体稍清亮。 + 稍能查到凝集，稍有卷边形成：凝集物间液体呈红色。 ─ 无凝集，呈均匀粉红色。 【不良反应】一般无可见的不良反应。【注意事项】 1. 使用前应充分摇匀，出现污染或有摇不散的凝块时不得使用； 2. 抗原和血清应在室温中放置 30～60 分钟后，再进行试验。【规格】5ml/瓶、10ml/瓶、20ml/瓶。 【包装】5 瓶/盒、10 瓶/盒、20 瓶/盒。 【贮藏与有效期】2～8℃保存，有效期为 12 个月。【批准文号】兽药生字（2011）********7 | 6.00 | |||||||||
| 手 套 | 材质: 光里乳胶 | 2000.00 | |||||||||
| 离心管 | 规格:2ml.连盖圆底离心管 EP管 规格：500支/包 颜色:透明 材质：pp料（聚丙烯） 可121度高温高压灭菌，冷却后再使用 | 8000.00 | |||||||||
| 新城疫抗体 | 规格:2ml.1. 抗原为鸡新城疫病毒La Sota株接种SPF鸡胚培养，收获鸡胚尿囊液，经纯化、甲醛溶液灭活后，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。抗原效价不低于9Log2； 2. 试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年； 3. 试验结果阴阳性对照成立； 4．无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。 | 6.00 | |||||||||
| 吸 嘴1 | 精准、不歪斜、无菌、环保、适用多品牌移液枪。1000只/包;规格：200ul | 12000.00 | |||||||||
| 吸 嘴2 | 精准、不歪斜、无菌、环保、适用多品牌移液枪。1000只/包;规格：10ul | 4000.00 | |||||||||
| 一次性采血器 | 可用于动物采血，又可当作试管盛血，采血一次到位，保证了检验质量，操作方便， | 4000.00 | |||||||||
| 消毒酒精 | 75% 乙醇 | 20.00 | |||||||||
| 棉 签 | 经环氧己烷灭菌，吸水性好，洁净卫生，使用安全 | 8.00 | |||||||||
| 生理盐水 | 0.9%氯化钠注射 | 20.00 |
| 此公示期为二个工作日 |
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