2018年福建省福州市动物疫病控制中心实验室诊断试剂和仪器采购项目合同公告
2018年福建省福州市动物疫病控制中心实验室诊断试剂和仪器采购项目合同公告
福州市政府采购合同
编制说明
1、签订合同应遵守《中华人民共和国政府采购法》、《中华人民共和国合同法》。
2、签订合同时,采购人与中标人应结合招标文件第五章规定填列相应内容。招标文件第五章已有规定的,双方均不得对规定进行变更或调整;招标文件第五章未作规定的,双方可通过友好协商进行约定。
甲方:福州市农业局
乙方:福州葆顺牧业有限公司中型企业无
根据招标编号为[350100]FJLQ[GK]*******的2018年福州市动物疫病控制中心实验室诊断试剂和仪器采购项目项目(以下简称:“本项目”)的招标结果,乙方为中标人。现经甲乙双方友好协商,就以下事项达成一致并签订本合同:
1、下列合同文件是构成本合同不可分割的部分:
1.1合同条款;
1.2招标文件、乙方的投标文件;
1.3其他文件或材料:□无。□无。
2、合同标的
包号 | 品目号 | 品目名称 | 商品名称 | 数量 | 计量 单位 | 产地 类型 | 单价 | 金额 | 品牌 | 型号技术 指标等 | ||||||
1 | 1-1 | 兽用诊断制品 | 禽流感H5标准阳性血清 | 2 | 瓶 | 国内 | 250 | 500 | 哈维科 | 1ml | ||||||
1 | 1-2 | 兽用诊断制品 | 禽流感H5标准阴性血清 | 2 | 瓶 | 国内 | 100 | 200 | 哈维科 | 1ml/瓶 | ||||||
1 | 1-3 | 兽用诊断制品 | 禽流感H7血凝抑制试验抗原 | 10 | 瓶 | 国内 | 250 | 2500 | 哈维科 | 2ml/瓶 | ||||||
1 | 1-4 | 兽用诊断制品 | 禽流感H7标准阳性血清 | 4 | 瓶 | 国内 | 250 | 1000 | 哈维科 | 1ml/瓶 | ||||||
1 | 1-5 | 兽用诊断制品 | 禽流感H7标准阴性血清 | 4 | 瓶 | 国内 | 100 | 400 | 哈维科 | 1ml/瓶 | ||||||
1 | 1-6 | 兽用诊断制品 | 新城疫血凝抑制试验抗原 | 5 | 瓶 | 国内 | 150 | 750 | 哈维科 | 2ml/瓶 | ||||||
1 | 1-7 | 兽用诊断制品 | 新城疫标准阳性血清 | 2 | 瓶 | 国内 | 150 | 300 | 哈维科 | 2ml/瓶 | ||||||
1 | 1-8 | 兽用诊断制品 | 新城疫标准阴性血清 | 2 | 瓶 | 国内 | 100 | 200 | 哈维科 | 1ml/瓶 | ||||||
1 | 1-9 | 兽用诊断制品 | 鸡白痢试验抗原 | 200 | 瓶 | 国内 | 1 | 200 | 中监所 | 10ml | ||||||
1 | 1-10 | 兽用诊断制品 | 鸡白痢试验阳性血清 | 200 | 瓶 | 国内 | 1 | 200 | 中监所 | 10ml | ||||||
1 | 1-11 | 兽用诊断制品 | 口蹄疫(O型)VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒 | 1 | 盒 | 国内 | 2000 | 2000 | 兰州所 | 2*96/盒 | ||||||
1 | 1-12 | 兽用诊断制品 | 狂犬病ELISA抗体试剂盒 | 1 | 盒 | 国内 | 1000 | 1000 | 世纪元亨 | 1*96/盒 | ||||||
1 | 1-13 | 兽用诊断制品 | 布病虎红平板试验抗原 | 5 | 瓶 | 国内 | 200 | 1000 | 中监所 | 10ml/瓶 | ||||||
1 | 1-14 | 兽用诊断制品 | 禽流感H5荧光RT-PCR试剂盒 | 15 | 盒 | 国内 | 2100 | 31500 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
1 | 1-15 | 兽用诊断制品 | 禽流感H7荧光RT-PCR试剂盒 | 5 | 盒 | 国内 | 2100 | 10500 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
1 | 1-16 | 兽用诊断制品 | 禽流感H9荧光RT-PCR试剂盒 | 2 | 盒 | 国内 | 2100 | 4200 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
1 | 1-17 | 兽用诊断制品 | 鸭瘟荧光RT-PCR试剂盒 | 1 | 盒 | 国内 | 2100 | 2100 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
1 | 1-18 | 兽用诊断制品 | 禽白血病ELISA抗体试剂盒 | 1 | 盒 | 进口 | 5900 | 5900 | IDEXX | 5*96/盒 | ||||||
1 | 1-19 | 兽用诊断制品 | 口蹄疫(0型)ELISA抗体试剂盒 | 4 | 盒 | 进口 | 8800 | 35200 | IZSLER | 5*96/盒 | ||||||
1 | 1-20 | 兽用诊断制品 | 口蹄疫(A型)ELISA抗体试剂盒 | 4 | 盒 | 进口 | 8800 | 35200 | IZSLER | 5*96/盒 | ||||||
1 | 1-21 | 兽用诊断制品 | 猪瘟ELISA抗体试剂盒 | 4 | 盒 | 进口 | 6900 | 27600 | IDEXX | 5*96/盒 | ||||||
1 | 1-22 | 兽用诊断制品 | 口蹄疫(亚I型)ELISA抗体试剂盒 | 1 | 盒 | 进口 | 8800 | 8800 | IZSLER | 5*96/盒 | ||||||
1 | 1-23 | 兽用诊断制品 | 伪狂犬(GB)ELISA抗体试剂盒 | 5 | 盒 | 进口 | 5400 | 27000 | IDEXX | 6*96/盒 | ||||||
1 | 1-24 | 兽用诊断制品 | 伪狂犬(GE)ELISA抗体试剂盒 | 1 | 盒 | 进口 | 5400 | 5400 | IDEXX | 6*96/盒 | ||||||
1 | 1-25 | 兽用诊断制品 | 小反刍兽疫ELISA抗体试剂盒 | 1 | 盒 | 进口 | 9800 | 9800 | ID.Vet | 4*96/盒 | ||||||
1 | 1-26 | 兽用诊断制品 | 猪兰耳(PRRS)ELISA抗体试剂盒 | 4 | 盒 | 进口 | 12900 | 51600 | IDEXX | 5*96/盒 | ||||||
1 | 1-27 | 兽用诊断制品 | 布病ELISA抗体试剂盒 | 1 | 盒 | 进口 | 3360 | 3360 | Svanova | 2*96/盒 | ||||||
1 | 1-28 | 兽用诊断制品 | 猪瘟荧光RT-PCR试剂盒 | 15 | 盒 | 国内 | 2100 | 31500 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
1 | 1-29 | 兽用诊断制品 | 禽流感H5血凝抑制试验抗原 | 5 | 瓶 | 国内 | 250 | 1250 | 哈维科 | 2ml/瓶 | ||||||
1 | 1-30 | 兽用诊断制品 | 磁珠法病毒核酸提取试剂盒 | 50 | 盒 | 国内 | 1408 | 70400 | 生科尚仪 | 64头份/盒 | ||||||
1 | 1-31 | 兽用诊断制品 | 小反刍兽疫荧光RT-PCR试剂盒 | 10 | 盒 | 国内 | 1000 | 10000 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
1 | 1-32 | 兽用诊断制品 | 鸡新城疫荧光RT-PCR试剂盒 | 8 | 盒 | 国内 | 2100 | 16800 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
1 | 1-33 | 兽用诊断制品 | 猪伪狂犬荧光RT-PCR试剂盒 | 2 | 盒 | 国内 | 2100 | 4200 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
1 | 1-34 | 兽用诊断制品 | 口蹄疫荧光RT-PCR试剂盒 | 15 | 盒 | 国内 | 2100 | 31500 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
1 | 1-35 | 兽用疫苗 | 猪兰耳病(变异株)荧光RT-PCR试剂盒 | 15 | 盒 | 国内 | 2100 | 31500 | 生科尚仪 | 48头份/盒 | ||||||
合计: | 465560.00 |
3、合同总金额
3.1合同总金额为人民币大写:肆拾陆万伍仟伍佰陆拾元整元(¥465560.00)。
4、合同标的交付时间、地点和条件
4.1交付时间:合同签订后 (30 ) 天内交货;
4.2交付地点:福建省福州市鼓楼区杨桥中路;
4.3交付条件:验收合格后。
5、合同标的应符合招标文件、乙方投标文件的规定或约定,具体如下:
(1)品目号1-1禽流感H5标准阳性血清、品目号1-2禽流感H5标准阴性血清、品目号1-3禽流感H7血凝抑制试验抗原、品目号1-4禽流感H7标准阳性血清、品目号1-5禽流感H7标准阴性血清品目号1-29禽流感H5血凝抑制试验抗原 1.禽流感H5、H7阳性血清、抗原到用户手上有效期(—20℃)必须大于16个月; 2.—20℃可以保存2年; (2)品目号1-6新城疫血凝抑制试验抗原、品目号1-7新城疫标准阳性血清、品目号1-8新城疫标准阴性血清 1.新城疫抗原、阳性血清到用户手上有效期必须大于8个月; 2.—20℃可以保存1年; (3)品目号1-9鸡白痢试验抗原、1-10鸡白痢试验阳性血清 1.白痢抗原与阳性血清到用户手上有效期必须大于6个月; (4)品目号1-11口蹄疫(O型)VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒 1.原理和用途:可区分口蹄疫病毒感染动物及疫苗免疫动物; 2.包装规格:2X96; 1猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗原包被板2X96孔2羊抗猪IgG抗体辣根酶结合物2瓶 3血清样本稀释液2瓶(各12ml)420倍浓缩洗涤液2瓶(各50ml) 5阴性对照(已灭活)1管(1.5ml)6阳性对照(已灭活)1管(1ml) 7显色底物液A瓶(12ml)8显色底物液B瓶(12ml) 9显色终止液1瓶(12ml)10血清稀释板1块(96孔) 11使用说明书1份样本要求血清。 3.检测流程 1平衡:将试剂盒从冷藏环境中取出,置室温平衡30分钟后使用,液体试剂用前混匀。 2配液“将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释备用。 3设定:留1个空白孔,3个阴性对照孔,各2个阳性对照孔,其余为待测样本孔。 4待测标本预稀释”往稀释板孔内每孔加100ul样本稀释液,分别加入5ul待测样本。 5加样:空拍孔不加样:3个阴性对照孔各加100ul阴性对照,2个阳性对照孔各加100ul阳性对照其余孔分别按预先设定加100ul稀释的待测样本。加样过程时间跨度应尽量短。 6温育:震荡混匀置37℃温箱或水浴锅中,反应30分钟。 7洗板:弃去反应液,每孔加入稀释后的洗涤液300ul,浸泡15秒,甩弃洗液连续洗板4次后拍干。 8加酶:空白孔不加酶:其余各孔加100ul羊抗猪IgG抗体辣根酶结合物(艳红色)。 9温育“置37℃温箱或水浴锅中:反应30分钟。 10洗板:弃去反应液,每孔加入稀释后的洗涤液300ul,浸泡15秒,甩弃洗液连续洗板5次后拍干。 11显色:每孔(包括空白对照孔)依次加入显色底物液A、显色底物液B各50ul,震荡混匀置37℃温箱或水浴锅中,显色15分钟。 12终止:每孔(包括空白对照孔)依次加入显色终止液各50ul,震荡混匀终止反应。 13测定:用空白对照孔调零后测定各孔450nm的OD值。也可用双波长450nm/630nm测定各孔OD值。 4.结果判定 临界值=(阳性对照均值-阴性对照均值)X0.17。阳性对照测定OD值应不低于0.500,否则试验无效.样本测定OD值≥临界值者判为阳性.样本测定OD值<临界值者为阴性(建议对OD值<临界值,≥0.5倍临界值的样本跟踪观察)。本试剂与猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试剂盒联合使用时,非结构蛋白抗体阳性则为感染动物,非结构蛋白抗体阴性本试剂阳性为疫苗接种动物,两试剂均阴性时为正常未免疫动物。 5.有效期到用户手上有效期应≥6个月。 (5)品目号1-12狂犬病ELISA抗体试剂盒 1.规格:96孔/盒; 2.用途:应用间接酶联免疫法(ELISA)检测犬血清或血浆中抗狂犬病毒 IgG 抗体,适用于犬狂犬病毒的免疫效果监测和抗体水平调查; 3.试剂盒组成: 预包被狂犬病毒抗原的微孔板:192孔;狂犬病毒IgG 酶标记物:1瓶;狂犬病毒IgG 阳性对照(直接使用):1支;狂犬病毒IgG临界对照(直接使用):1支;狂犬病毒IgG阴性对照(直接使用):1支;显色液A:1瓶;显色液B:1瓶;终止液:1瓶;浓缩洗涤液(10倍):1瓶;样品稀释液:2瓶;封板膜:2片;密封袋:1个;使用说明书:1份;记录纸:1份。 4.所需仪器: 450nm波长的酶标仪;(10~100)μL 移液器;37℃恒温箱或水浴箱。 5.样本要求: 分离样品:将采集到的待检犬血液样品离心,分离出待检犬血清或血浆。 使用无菌犬血清或血浆进行检测,应尽量避免使用染菌、溶血和高血脂的样品;室温保存样品不要超过 8 小时,若实验在 8 小时以后进行,需将样品保存在(2~10)℃,如保存超过1周则应保存在-20℃并避免反复冻融。 6.操作步骤: 1)试剂盒放置室温平衡(20~30)min。取出浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水作10倍稀释备用。 2)稀释样品:将已分离好的犬血清或血浆用样品稀释液做1:10稀释,即取50μL血清或血浆加入到0.5mL样品稀释液中,并充分混匀。 3)加样:取所需量的预包被微孔板条固定于板架上,依次加入稀释好的样品,100μL/孔,然后将阳性、阴性对照各加1孔,临界对照加3孔,100μL/孔,另留一孔不加样品作空白对照孔,在记录纸上记录各样品和参 考品的次序或位置。 4)孵育:加样完成后,置37℃恒温箱或水浴箱(用封板膜覆盖板条,以避免水珠滴入微孔)中孵育30min。 5)洗板:甩净孔中液体,拍干,用稀释好的洗涤液加满每孔,停留1min后甩净、拍干,反复洗板3次。 6)加酶:除空白对照外,其余各孔垂直滴加酶标记物50μL(1滴),置37℃孵育30min。 7)显色:重复步骤5洗板3次,拍干后每孔(含空白孔)垂直滴加显色液A、B各50μL(1 滴),置37℃避光显色10min。 8)终止:每孔(含空白孔)立即加入终止液50μL(1滴),混匀后以空白孔调零,用酶标仪450nm波长测定A/OD值。 7:结果判定 在酶标仪上,以空白孔调零,450nm波长测定A/OD值。阴性对照值应≤0.10,临界对照A/OD值应在0.15~0.40之间,证明实验成立。 如样品孔A/OD值≥临界对照A/OD值的平均值判为阳性,达到抗体保护水平;反之为阴性。 8:有效期:贮藏要求:2℃~8℃。到用户手上保质期大于等于8个月。 (6)品目号1-13布病虎红平板试验抗原 布病虎红平板试验抗原与阳性血清有效期必须大于8个月。 (7)品目号1-18禽白血病ELISA抗体试剂盒 1.规格:(96孔╳5板)/盒; 2.用途:检测鸡血清中禽白血病病毒(A亚群和B亚群)抗体; 3.试剂构成:ALV包被板:5块;ALV阳性对照,叠氮钠防腐;阴性对照,叠氮钠防腐;辣根过氧化物酶标记的(羊抗)鸡抗体,庆大霉素防腐:样品稀释缓冲液,叠氮钠防腐;TMB底物液;终止液; 4.样品的处理 检测之前要用样品稀释液将被检样品进行500倍稀释。 不用稀释对照。 5.操作步骤 1)在试剂恢复到室温后,并将其振摇混匀再进行使用。 2)取出抗原包被板并在记录表上标记好被检样品的位置。 3)取100μL未稀释的阴性对照液加入A1孔和A2孔中。 4)取100μL未稀释的阳性对照液加入A3孔和A4孔中。 5)取100μL稀释的被检样品液加入相应的孔中。所有被检样品都应进行双孔测定。 6)室温下孵育30 min。 7)每孔加约350μL的蒸馏水或去离子水进行洗板,洗3~5次。 8)每孔加100μL的酶标羊抗鸡抗体。 9)室温下孵育30 min。 10)重复洗板。 11)每孔加100μL的TMB底物液。 12)室温下孵育15 min。 13)每孔加100μL的终止液。 14)酶联检测仪空气调零。 15)测定各孔于650nm波长的吸光值(A650)。 6.结果 只有阳性对照平均值和阴性对照平均值的差值大于 0.075,阴性对照平均值小于或等于0.150,该检测结果才能有效。检测样品中是否含有禽白血病病毒的抗体主要由该样的测定值与阳性对照平均值的比值决定。阳性对照已进行标准化处理,含有显著水平的抗禽白血病病毒抗体。被检样品的抗体水平主要由其测定值与阳性对照测定值的比值(S/P)确定。抗体滴度按下列方程式进行计算。 7.结果判定 S/P比值小于或等于0.4,判为阴性。 S/P值大于 0.4(抗体滴度大于844) ,判为阳性,表明该动物已进行了免疫或感染了禽白血病病毒(A 亚群或B亚群) 。 8.计算方法 阴性对照平均值(NCX):[A1(A650)+A2(A650)]/2=NCX 阳性对照平均值(PCX):[ A3(A650)+A4(A650)]/2=PCX S/P比值:(样品平均值-NCX)/(PCX-NCX)= S/P 1:500稀释样品S/P 比值与其抗体滴度的关系: Log10 抗体滴度=1.09(Log10S/P)+3.36 9.其他要求:CSFV E2抗体,Aujeszky全病毒抗体,Aujeszky病毒缺失基因抗体,禽白血病AB型抗体,猪繁殖与呼吸综合征抗体试剂盒需为同一品 牌产品,并保证上述品 牌稀释液均为10倍稀释,且可以通用; 10.有效期:到用户手上有效期应≥6个月。 (8)品目号1-19口蹄疫(0型)ELISA抗体试剂盒 1.规格(96孔╳5板)/盒 ; 2.检测的原理:用于检测任何易感动物血清或血浆中口蹄疫病毒感染的或接种疫苗的抗体。 包被在固相微孔板中的血清O型特异性单抗(MAb)用于捕获灭活的口蹄疫病毒抗原。FMDV抗原为O型 Manisa株。 3.试剂盒组份:FMDV O型抗原包被的密封微孔板(被特异性的单克隆抗体MAb所捕获);酶标记物:浓缩的辣根过氧化物酶标记的FMDVO型中和单克隆抗体,10倍浓缩;FMDV O型阳性对照血清;FMDV阴性对照,PBS-吐温溶液,10倍浓缩;ELISA稀释液(用于血清和酶标记物);底物/显色溶液(TMB);终止液(H2SO4 ,0.6N)。 4.检测程序 1)血清分配: 每块板中都要加入以下对照: 4个孔加入即用型的阴性对照;从这些孔中获得的平均OD值作为参 考值(=无阻断反应),用于计算被检血清的阻断率%。 2个孔中加入2个稀释度的阳性对照血清(1/10,1/30)。 用ELISA稀释液将阳性对照血清和被检血清进行稀释,每个孔中加入50μL。对于被检血清,监测时1/30稀释。具体检测程序如下: 打开密封的ELISA包被微孔板; 在4个相对应的孔中每孔加入50μL的阴性对照(即用型);在2个孔中分别加入50μL 1/10 倍和1/30倍稀释的阳性对照; 分别将50μL的1/30 倍稀释的被检样品加入到剩下的检测孔中,注意每个样本都使用不同吸头; 轻轻地振动微孔板;盖上反应板并在室温孵育1小时(温度范围18-25℃); 可以使用不同的布局,条件是必须包括所有的对照孔(阴性和阳性对照)。 微孔板的布局:血清稀释方案 *************** ANC******* ********677583 BNC****************87684 CNC****************97785 DNC****************078 86 EC pos1/********139*****3717987 FC pos1/*********************** G**************** 738189 H***********************NC:阴性对照;C pos: 阳性对照血清,1/10 - 1/30倍稀释;1-90: 待检血清,1/30倍稀释。 酶标记物: 不需要洗涤,每孔加入25μL适当稀释的HRPO-结合物; 盖上反应板并在室温孵育1小时(温度范围18-25℃); 洗涤: 将反应板内液体倒掉,并用力拍打,除去残存的所有液体; 每孔加入200μL的洗液,在室温孵育3分钟; 除去孔内液体,重复3次,最后一次孵育5分钟(共计4次); 将块板中残留的洗涤液扣拍到吸水材料上。 底物/显色液: 在所有的孔中每孔加入50μL的底物/显色液(室温下平衡); 盖上反应板,室温下避光孵育20分钟,从加入第一孔时开始计时; 终止: 按照加入底物溶液的顺序,每孔加入50μL的终止液终止反应。读数之前轻轻地混匀孔内的溶液。 读数: 终止后,立即用酶标仪在450nm的波长下读取每个孔的光密度(OD)值。 结果计算 阳性对照和被检血清按照下面的方法计算阻断率: 阻断率% = 100 - (血清 OD / 参 考 OD值) x 100 参 考 OD值 = 四个阴性对照孔的平均OD值 检测的有效性标准 阴性对照OD值必须≥1; 阳性对照血清的阻断率在1/10稀释时应≥90%,在1/30稀释时应>50%。 结果解析 如果用于监测,血清判定:阻断率≥ 50% 时为阳性;阻断率< 50% 时为阴性。 5.其他要求:O型SpC抗体,AsiaI型SpC抗体,A型SpC抗体稀释液均为10倍稀释,且可以通用。 6.有效期:到用户手上有效期应≥8个月。 (9)品目号1-20口蹄疫(A型)ELISA抗体试剂盒 1.规格:(96孔╳5板)/盒 ; 2.检测的原理及应用:本试剂盒用于检测任何易感动物血清或血浆中口蹄疫病毒感染的或接种疫苗的抗体。包被在固相微孔板中的血清A型特异性单抗(MAb)用于捕获灭活的口蹄疫病毒抗原; 3.试剂盒组份:FMDV A型抗原包被的密封微孔板(被特异性的单克隆抗体MAb所捕获);酶标记物:浓缩的辣根过氧化物酶标记的FMDV A型中和单克隆抗体,10倍浓缩;FMDV A型阳性对照血清;FMDV阴性对照;PBS-吐温溶液,10倍浓缩;ELISA稀释液(用于血清和酶标记物);底物/显色溶液(TMB);终止液(H2SA4); 4.试剂准备所有溶液必须在使用前恢复到室温,最佳的温度范围是18-25℃; 5.检测程序 血清分配: 每块板中都要加入以下对照: 4个孔加入即用型的阴性对照;从这些孔中获得的平均OD值作为参 考值(=无阻断反应),用于计算被检血清的阻断率%。 2个孔中加入2个稀释度的阳性对照血清(1/10,1/30)。 用ELISA稀释液将阳性对照血清和被检血清进行稀释,每个孔中加入50μL。对于被检血清,建议监测时1/30稀释。按照下面的程序,将它们直接加入并在抗原包被孔中稀释(见所附方案)。 打开密封的ELISA包被微孔板; - 在4个相对应的孔中每孔加入50μL的阴性对照(即用型); - 在2个孔中分别加入50μL 1/10 倍和1/30倍稀释的阳性对照。 -分别将50μL的1/30 倍稀释的被检样品加入到剩下的检测孔中,注意每个样本都使用不同吸头。 - 轻轻地振动微孔板;盖上反应板并在室温孵育1小时(温度范围18-25℃); 可以使用不同的布局,条件是必须包括所有的对照孔(阴性和阳性对照)微孔板的布局:血清稀释方案 *************** A NC***************677583 BNC****************87684 CNC****************97785 DNC********846 5462707886 EC pos1/********139*****3717987 FC pos1/*********************** G******** ********738189 H*********************** NC:阴性对照;C pos: 阳性对照血清, 1/10 - 1/30倍稀释;1-90: 待检血清,1/30倍稀释。 酶标记物: 不需要洗涤,每孔加入25μL适当稀释的HRPA-结合物; 盖上反应板并在室温孵育1小时(温度范围18-25℃); 洗涤: 将反应板内液体倒掉,并用力拍打,除去残存的所有液体; 每孔加入200μL的洗液,在室温孵育3分钟; 除去孔内液体,重复3次,最后一次孵育5分钟(共计4次); 将块板中残留的洗涤液扣拍到吸水材料上。 底物/显色液: 在所有的孔中每孔加入50μL的底物/显色液(室温下平衡); 盖上反应板,室温下避光孵育20分钟,从加入第一孔时开始计时; 终止: 按照加入底物溶液的顺序,每孔加入50μL的终止液终止反应。读数之前轻轻地混匀孔内的溶液。 读数: 终止后,立即用酶标仪在450nm的波长下读取每个孔的光密度(OD)值。 结果计算 阳性对照和被检血清按照下面的方法计算阻断率: 阻断率% = 100 - (血清 OD / 参 考 OD值) x 100 参 考OD值 = 四个阴性对照孔的平均OD值 检测的有效性标准 阴性对照OD值必须≥0.8; 阳性对照血清的阻断率在1/10稀释时应≥90%,在1/30稀释时应>50%。 结果解析 如果用于监测,血清判定:阻断率≥ 50% 时为阳性;阻断率< 50% 时为阴性。 6.其他要求:O型SpC抗体,AsiaI型SpC抗体,A型SpC抗体试剂盒需为同一品 牌产品,并保证上述品 牌稀释液均为10倍稀释,且可以通用。 7.有效期:到用户手上有效期应≥7个月。 (10)品目号 1-21猪瘟ELISA抗体试剂盒 1.规格:(96孔╳5板)/盒 。 2.原理:用于检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体的检测试剂盒。 3、试剂:所有的试剂均贮存于2-8℃。 4、样品准备 新鲜的、冷藏(2°C -8°C少于8天)的、冰冻的血清或血浆都可以用于检测。 5、操作步骤 在使用前,所有的试剂盒组分都必须恢复到18-26℃。 1)分别将50μL样品稀释液加入每个检测孔和对照孔中。 2)分别将50μL的阳性对照和阴性对照加入到相应的对照孔中,注意不同对照的吸头需要更换。 3)分别将50μL的被检样品加入到剩下的检测孔中,注意每个样本都使用不同吸头。 4)轻弹微量反应板或用振荡器振荡,将反应板中的溶液混匀。 5)在18-26℃孵育2小时(±5分钟)或过夜孵育(12-18小时)。无论选择哪种孵育方式,都要将微量反应板用封条封闭或于湿箱中室温孵育,避免液体挥发。 6)用300μL左右的洗涤溶液洗涤每个板孔3次。在每一次洗涤后,甩去每个板孔中的液体,在最后一次甩掉后,在吸水材料上用力扣板,吸去剩余的液体。在加入下一个试剂前,避免孔壁变干。 7)在每孔中加入100μL酶标抗体,用封条封闭反应板或置于湿盒中在18-26℃下孵育30分钟(±2分钟)。 8)重复步骤6。 9)每个反应孔中加入100μL的底物溶液,并于避光、18-26℃条件下放置10分钟(±1分钟)。加完第一孔后即可计时。 10)在第10分钟时每个反应孔中加入100μL的终止液终止反应。加终止液的顺序同步骤9,与底物的加入顺序相同。 11)在450nm处测定样本以及对照的吸光度值,也可用双波长(450nm和650nm)测定样本以及对照的吸光度值,空气调零。 12)计算样本和对照的平均吸光度值(见计算)。 结果 只有阴性对照的平均OD450大于0.500,阳性对照的阻断率大于50%,该检测结果才能有效。 计算 阴性对照平均值阳性对照平均值样本的计算 结果判定: 如果被检样本的阻断率大于或等于40%,该样本就可以被判为阳性(有CSFV抗体存在)。 如果被检样本的阻断率小于或等于30%,该样本就可以被判为阴性(无抗CSFV抗体存在)。 如果被检样本的阻断率在30-40%之间,就应在数日后再对该动物进行重测。如果重测结果仍为可疑,可使用血清中和实验方法确认。 检测方法总结 步骤操作1样品稀释液的加入在使用前,所有的试剂盒组分都必须恢复至18-26℃。试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。分别将50μL样品稀释液加入每个检测孔和对照孔中。 2样品的加入分别将50μL的阳性对照和阴性对照加入到相应的对照孔中,注意不同对照的吸头需要更换。 分别将50μL的被检血清或血浆样品加入到剩下的检测孔中,注意每个样本都使用不同吸头。 轻弹微量反应板或用振荡器振荡,将反应板中的溶液混匀。 3样品的孵育在18-26℃孵育2小时(±5分钟)或过夜孵育(12-18小时)。无论选择哪种孵育方式,都要将微量反应板用封条封闭或于湿箱中室温孵育,避免液体挥发。 4洗板吸取孔内液体至合适的废液缸。 用近300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次。在每一次洗涤后,甩去每个板孔中的液体,在最后一次甩掉后,在吸水材料上用力扣板,吸去剩余的液体。 5酶标抗体的加入在每个反应孔中加入100μL酶标抗体。 6酶标抗体孵育用封条封闭反应板或在湿盒中于18-26℃下孵育30分钟(±2分钟)。 7重复步骤48加入底物每个孔中加入100μL的底物溶液N.12。 9底物孵育于避光、18-26℃条件下放置10分钟(±1分钟)。加完第一孔后即可计时。 10终止反应在第10分钟时每个反应孔中加入100μL的终止液N.3终止反应。加入顺序同底物的加入顺序。同步骤8。 11读板450nm处测定样本以及对照的吸光度值,也可用双波长(450nm和650nm)测定样本以及对照的吸光度值,空气调零。 计算结果。 12判断血清,血浆≤30%30% -40%≥40% 阴性可疑阳性6.有效期:到用户手上有效期应≥8个月。 (11)品目号1-22亚洲I型口蹄疫ELISA抗体试剂盒 1.规格:(96孔╳5板)/盒 。 2.检测的原理及应用:本试剂盒用于检测任何易感动物血清或血浆中口蹄疫病毒感染的或接种疫苗的抗体。包被在固相微孔板中的血清亚洲I型特异性单抗(MAb)用于捕获灭活的口蹄疫病毒抗原。FMDV抗原为亚洲I型。 3.试剂盒组份:FMDV 亚洲I型抗原包被的密封微孔板(被特异性的单克隆抗体MAb所捕获);酶标记物:浓缩的辣根过氧化物酶标记的FMDV亚洲I型中和单克隆抗体,10倍浓缩;FMDV 亚洲I型阳性对照血清;FMDV阴性对照;PBS-吐温溶液,10倍浓缩;ELISA稀释液(用于血清和酶标记物);底物/显色溶液(TMB);终止液(H2SA4,0.6N)。 4.试剂准备:所有溶液必须在使用前恢复到室温,最佳的温度范围是18-25℃。 5.检测程序: 血清分配 每块板中都要加入以下对照: 4个孔加入即用型的阴性对照;从这些孔中获得的平均OD值作为参 考值(=无阻断反应),用于计算被检血清的阻断率%。 2个孔中加入2个稀释度的阳性对照血清(1/10,1/30)。 用ELISA稀释液将阳性对照血清和被检血清进行稀释,每个孔中加入50μL。对于被检血清,建议监测时1/30稀释。按照下面的程序,将它们直接加入并在抗原包被孔中稀释(见所附方案)。 打开密封的ELISA包被微孔板; - 在4个相对应的孔中每孔加入50μL的阴性对照(即用型); - 在2个孔中分别加入50μL 1/10 倍和1/30倍稀释的阳性对照。 -分别将50μL的1/30 倍稀释的被检样品加入到剩下的检测孔中,注意每个样本都使用不同吸头。 - 轻轻地振动微孔板; 盖上反应板并在室温孵育1小时(温度范围18-25℃); 可以使用不同的布局,条件是必须包括所有的对照孔(阴性和阳性对照)。微孔板的布局:血清稀释方案 *************** ANC***************677583 BNC****************87684 CNC5132129 3********97785 DNC****************07886 EC pos1/********139*****3717987 FC pos1/30816 243*************** G****************738189 H***********************NC:阴性对照;C pos: 阳性对照血清,1/10-1/30倍稀释;1-90:待检血清,1/30倍稀释。 酶标记物: 不需要洗涤,每孔加入25μL适当稀释的HRPA-结合物; 盖上反应板并在室温孵育1小时(温度范围18-25℃); 洗涤: 将反应板内液体倒掉,并用力拍打,除去残存的所有液体; 每孔加入200μL的洗液,在室温孵育3分钟; 除去孔内液体,重复3次,最后一次孵育5分钟(共计4次); 将块板中残留的洗涤液扣拍到吸水材料上。 底物/显色液: 在所有的孔中每孔加入50μL的底物/显色液(室温下平衡); 盖上反应板,室温下避光孵育20分钟,从加入第一孔时开始计时; 终止: 按照加入底物溶液的顺序,每孔加入50μL的终止液终止反应。读数之前轻轻地混匀孔内的溶液。 读数: 终止后,立即用酶标仪在450nm的波长下读取每个孔的光密度(OD)值。 结果计算 阳性对照和被检血清按照下面的方法计算阻断率: 阻断率% = 100 - (血清 OD / 参 考 OD值*) x 100 参 考OD值 = 四个阴性对照孔的平均OD值 检测的有效性标准 阴性对照OD值必须≥1; 阳性对照血清的阻断率在1/10稀释时应≥90%,在1/30稀释时应>50%。 结果解析 如果用于监测,血清判定:阻断率≥ 50% 时为阳性;阻断率< 50% 时为阴性。 6.其他要求:O型SpC抗体,A型、siaI型SpC抗体试剂盒稀释液均为10倍稀释,且可以通用。 7.有效期:到用户手上有效期应≥6个月。 (12)品目号1-23伪狂犬(GB)ELISA抗体试剂盒 规格:(96孔╳6板)/盒 。 试剂构成:应包含:Aujeszky全病毒抗原包被板,6块;阳性对照:抗Aujeszky全病毒猪血清,叠氮化钠作保护剂;阴性对照:不与Aujeszky反应的猪血清,叠氮化钠作保护剂;酶标抗体:抗PRV gB: HRPO结合物,用庆大霉素和凯松作保护剂;样品稀释液,用叠氮化钠作保护剂;TMB底物溶液;终止液;10倍浓缩洗涤液—用庆大霉素作保护剂。 个体样品(血清、血浆和肌肉抽提液) 用样品稀释液将被检血清样品和试剂盒提供的对照品作2倍(1/2)稀释。 洗涤溶液制备 将10倍浓缩洗涤液恢复到18-26℃并确保析出的盐类完全溶解。 操作步骤 所有试剂在使用前恢复至18-26°C,并旋转或颠倒混匀。 1) 取出抗原包被板并记录好样品位置。如果只是用部分反应板条,移取足够样品检测用的反应板条。将剩余反应板条,连同干燥剂,放入自封袋中密封好,返回2-8°C保存。 2)分别加100 μL 稀释好的阴性对照(2倍稀释)至合适的双孔中。 3.)分别加100 μL 稀释好的阳性对照(2倍稀释)至合适的双孔中。 4) 加100 μL稀释好样品至相应的孔。 5) 血清或血浆样本可在18-26°C孵育60分钟(±5分钟)(“短期孵育模式”)或2-8℃孵育16-20小时(“过夜孵育模式”)。 注意:肌肉提取液样品必须采用过夜孵育模式进行检测。 6) 每孔用大约300 μL洗涤溶液洗涤微孔3-5次。每次洗涤后,甩掉孔内的液体。每次洗涤之间和加入酶标抗体前,避免板孔变干。在最后一次甩板后,在吸水材料上扣板,彻底去掉剩余的液体。 7)每孔加入100μL酶标抗体。 8)在18- 26°C条件下孵育20分钟(±1分钟)。 9)重复步骤6。 10)每孔加100 μL TMB底物溶液。 11)在18- 26°C条件下孵育15(±1分钟)分钟。 12)每孔加入50μL终止液终止反应。 13)在650nm下测量记录样品和对照的吸光值A(650)。 14)计算结果。 阴性对照平均值A(650)减去阳性对照平均值A(650),其差必须大于等于0.300,检测结果才有效。 针对抗原成分的抗体的存在与否,通过计算每个样品的S/N值来决定。 计算 1阴性对照平均值()2阳性对照平均值()3计算样品/阴性对照(S/N)结果判定: 个体的血清和血浆,和肌肉提取液: (注意: 短期孵育模式和过夜孵育模式有不同的判断值。) A 短期孵育模式: (1小时孵育/ 18-26°C) 1)若S/N比值小于或等于0.60,样品为PRV抗体阳性。 2)若S/N比值小于或等于0.70但大于0.60,该样品必须被重测。如果结果相同,则过一段时间后重新从动物取样进行检测。 3)若S/N比值大于0.70,样品则为PRV抗体阴性。 B 过夜孵育模式: (16-20小时/ 2-8℃) 1)若S/N比值小于或等于0.50,样品为PRV抗体阳性。 2)若S/N比值小于或等于0.60但大于0.50,该样品必须被重测。如果结果相同,则过一段时间后重新从动物取样进行检测。 3)若S/N比值大于0.60,样品则为PRV抗体阴性。 注意:推荐重复确认所有阳性样品。 有效期:到用户手上有效期应≥8个月。 (13)品目号1-24伪狂犬(GE)ELISA抗体试剂盒 规格:(96孔╳6板)/盒 。 试剂构成:试剂应包含:Aujeszky病毒缺失基因抗原包被板,6块;阳性对照:猪抗Aujeszky病毒缺失基因血清,叠氮钠保存;阴性对照:对Aujeszky病毒缺失基因无反应的猪血清,叠氮钠保存;酶标抗体-辣根过氧化物酶标记抗Aujeszky病毒缺失基因抗体,庆大霉素和卡松保存;样品稀释液-叠氮钠保存;TMB底物液;终止液;10倍浓缩洗涤液-庆大霉素保存;其他组件:密封塑料袋。 样品的制备 用样品稀释液将被检样品稀释2倍 (1:2) 。 操作步骤 所有试剂在使用前一律恢复至室温(18-26℃)。试剂应该旋转或颠倒混匀。 1)取出抗原包被板,在记录表上记录样品的位置。若只是用部分板条,则移取足够的被检样品数量的板孔条。将其它板条和干燥剂放入额外提供的密封袋中,放回2-8℃保存。 2)在A1,A2和A3孔内加入100μL两倍稀释(1:2)的阴性对照。 3)在A4,A5孔内加入100μL两倍稀释(1:2)的阳性对照。 4)在其余的孔内分别加入100μL已稀释好的被检样品。 5)室温(18-26℃)下孵育60分钟(±5分钟)或2-8℃孵育过夜(可以将微量反应板用封条封闭)。 6)用大约300μL洗涤液洗涤板孔,重复3-5次。每次洗涤时洗涤液都应吸出丢弃。在洗板和加入标记物之间应避免包被板变干。在最后一次洗涤液吸出后,将板中残留洗涤液扣拍到吸水材料上。 7)每孔加入100μL辣根过氧化物酶标记抗PRV gpI抗体。 8)室温(18℃-26℃)下孵育20分钟(±1分钟)。 9)重复步骤6。 10)每孔加入100μL TMB底物液。 11)室温(18℃-26℃)下孵育15分钟(±1分钟)。 12)每孔加入50μL终止液,使反应终止。 13)测量并且记录被检样品和对照的A(650)。 14)计算结果。 结果 阴性对照A(650)的平均值减去阳性对照A(650)的平均值必须大于或等于0.300,试验方能有效。 首先通过计算每个样品的S/N值,判定其gpI抗体的有无。具体方法参见样品结果的计算。 计算方法 1)阴性对照平均值的计算(NCx) NCx =A1A(650)+A2A(650)+A3A(650)3 2)阳性对照平均值的计算(PCx) PCx=A4A(650)+A5 A(650)2 3) 样品/阴性对照比率的计算(S/N) S/N=样本A(650) NCx 结果判定 1)如果S/N值低于或等于0.60,样品应判定为PRVgpⅠ抗体阳性。 2)如果S/N值大于0.60但小于或等于0.70,样品应重测。如果试验结果不变,间隔一定时间后重新采样、检测。 3)如果S/N值大于0.70,样品应判定为PRVgpⅠ抗体阴性。 确定阳性应作两次重复 有效期:到用户手上有效期应≥8个月。 (14)品目1-25小反刍兽疫ELISA抗体试剂盒 1.本试剂盒用于检测绵羊、山羊血清或血浆样品中小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体。 2.规格:4*96孔/盒 3.组分与用法 编号名 称装量用法 PPRV-ⅠPPRV抗原包被板96孔板x2块直接使用 PPRV-Ⅱ样品稀释液 lOmLxl瓶直接使用 PPRV-ⅢPPRV阴性血清200nLxl管直接使用 PPRV-ⅣPPRV阳性血清200nLxl管直接使用 PPRV-Ⅴ洗涤液20x20mLxl瓶用纯水或去离子水做20倍稀释后使用 PPRV-Ⅵ酶标抗体10xlmLx2管用酶标抗体稀释液(VII)做10倍稀释后使用 PPRV-Ⅶ酶标抗体稀释液20mLxl瓶直接使用 PPRV-Ⅷ底物溶液20mLxl瓶直接使用 PPRV-Ⅸ终止液20mLxl瓶直接使用 酶标抗体10X(VI)、阴性血清(III)、阳性血清(IV)以及底物溶液(Vin)必须在5±3°C下贮存,其他试剂可放置在2~26°c保存。 4.使用方法 4.1实验准备 1)为保证不同样品的孵育时间一致,可先取待检样品和阴性血清(III)、阳性血清(IV)不低于25JIL分别加入96孔板(单独准备)中并做好记录,然后用多道移液器移至PPRV抗原包被板(I)相应孔中。 2)试剂盒各个组分在使用前均须恢复至室温(21±5°C),加液前充分摇匀。 4.2操作步骤 PPRV抗原包被板(I)上阴性血清(m)、阳性血清(IV)和样品的分布如图N、P、S所示 *************** ANS5BNS6CPDPES1FS2GS3HS41)每孔加入25ul样品稀释液(Ⅱ); 2)在A1和B1孔中加入PPRV阴性血清(m)各25ul阳性对照; 3)在Cl和D1孔中加入PPRV阳性血清(IV)各25ul阴性对照; 4)剰余孔内加入25ul样品用于检测; 5)37°C孵育45±4分钟; 6)将洗涤液20(Ⅴ)用纯水或去离子水做20倍稀释,即为工作浓度的洗涤液l; 7)甩干PPRV抗原包被板孔中的液体,每孔加入约300μL洗涤液l,洗涤3次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干; 8)将酶标抗体10(Ⅵ)用酶标抗体稀释液(Ⅶ)做10倍稀释,即为工作浓度的酶标抗体l; 9)每孔中加入IOOμL的酶标抗体1 x; 10)室温(21±5°C)下孵育30±3分钟; 11)甩干PPRV抗原包被板孔中的液体,每孔加入约300mL洗涤液l×,洗涤3次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干; 12)每孔中加入100μL底物溶液(Ⅷ); 13)室温(21±5℃)下避光孵育15±2分钟: 14)每孔中加入lOOμL的终止液(IX)终止显色反应; 15)使用酶标仪测定450nm波长处的值。 4.3结果判定 1)阴性对照平均值即应大于0.7; 2)阳性对照平均值即,应小于的30%, /<0.3,试验结果有效;否则重新进行试验。 3)样品的值即; 40按照以下方法计算样品S/N百分比(S/N%): 5)根据样品S/N百分比判定样品检验结果,S/N%<50%,结果为阳性;50%60%,结果为阴性;当样品判定为可疑时应进行重检,重检结果仍为可疑则判定为阳性。 4.4注意事项 1)需自备的试验用器材:96孔板、100μL、200μL的单道或多道微量移液器,一次性吸头,酶标仪,纯水或去离子水。 2)底物溶液(Ⅷ)对皮肤有刺激作用,终止液(Ⅸ)为稀硫酸溶液,若接触到皮肤或眼睛,请及时用大量清水洗涤并就医。 3)底物溶液(Ⅷ)应避光保存并避免接触氧化物。 4)需稀释的组分洗涤液20×(V)、酶标抗体10×(Ⅵ)在稀释时应准确量取。 5)试剂盒的所有组分没有任何传染性。 5.有效期:2~8°C保存,有效期到用户手上≥8个月。 (15)品目1- 26 猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒 1.规格:(96孔╳5板)/盒 2.试剂:所有试剂在2-8℃保存。 试剂构成 PRRSV 抗原包被板,5块;阳性对照;阴性对照;酶标抗体;样品稀释液;TMB底物液;终止液;浓缩洗涤液(10×)。 试剂的准备 3.洗涤液 估算洗板所需要的洗涤液的体积。使用前浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水10倍稀释。在无菌条件下配制(无菌水和无菌容器)的洗液可以在2-8℃条件下保存7天。 4.样品的准备 用样品稀释液40倍稀释待检样品。 不用稀释对照。 5.操作步骤 使用前所有试剂应恢复至18-26℃。试剂应轻轻旋转或振荡混合。每个样品使用一个单独的吸头。 1)取出抗原包被板,在记录表上记录样本的位置。 2)加入100mL没有稀释的阴性对照,每次检测加两孔。 3)加入100mL没有稀释的阳性对照,每次检测加两孔。 4)在相应的孔中加入100mL已稀释好的样品。 5)18-26℃条件下孵育30分钟(±2分钟)。 6)将各孔的液体弃入废液筒。 7)用大约300mL洗涤液洗涤板孔,共洗涤3-5次。每次洗涤后应吸去孔内的液体。在两次洗涤之间和加入酶标抗体之前,应避免包被孔干燥。在最后一次洗涤液吸去后,将孔中残留的洗涤液在吸水纸上拍干。 8)每孔加入100mL酶标抗体。 9)18-26℃条件下孵育30分钟(±2分钟)。 10)重复步骤6和7。 11)每孔加入100mLTMB底物液。 12)18-26℃条件下孵育15分钟(±1分钟)。 13)每孔加入100mL终止液,终止反应。 14)测量并且记录样本和对照的吸光值A(650)。 15)计算结果。 6.结果 要使试验有效,需符合下列条件:阳性对照的平均值减去阴性对照的平均值(PCx-NCx)必须大于或等于0.150;此外,阴性对照的平均值(NCx)必须小于或等于0.150。 PRRSV抗体的有无通过计算样品与阳性对照(S/P)的比值进行判定。具体计算方法见样品结果计算部分 计算方法 阴性对照平均值(NCx)的计算:NCx=(NC1 A650+ NC2 A650)/2 阳性对照平均值(PCx)的计算:PCx=(PC1 A650+ PC2 A650)/2 样本的计算: S/P=(样本A650- NCx)/(PCx- NCx) 7.结果判定 PRRSV抗体的有无通过计算每个样品的S/P值判定。 如果S/P值低于0.40,样品应判定为PRRSV抗体阴性。 如果S/P值大于或等于0.40,样品应判定为PRRSV抗体阳性。 在95%的置信区间水平(CL)上,采用该试剂盒检测PRRSV抗体具有以下相对的敏感性和特异性。 检测试剂盒相对敏感性和特异性 检测已知阳性和阴性的样品 实验研究1样品数量 试剂盒/参 考方法样品类型相对的敏感性和特异性 95%的置信区间(CL)卡帕 统计 +/+ 1029-/+ 13+/- 1-/- 1446血清98.8%(95%CL 97.8%-99.3%) 99.9%(95%CL 99.6%-100%)0.991.阳性样品来源于人工感染动物的样品和田间阳性样品(根据猪群监测历史,经 PRRS 2XR 或间接免疫荧光方法(IFA)结果确认);阴性样品从已知阴性群获得。 8.其他要求:CSFV E2抗体,Aujeszky全病毒抗体,Aujeszky病毒缺失基因抗体,禽白血AB病抗体,猪繁殖与呼吸综合征抗体试剂盒需为同一品 牌产品,并保证上述品 牌稀释液均为10倍稀释,且可以通用。 9.有效期:到用户手上有效期应≥7个月。 (17)品目号1-30磁珠法病毒核酸提取试剂盒 1.产品原理:裂解液裂解细胞后,游离出来的核酸分子被磁珠特异性的吸附,通过内置磁棒磁吸、转移等动作使磁性颗粒(磁珠-核酸分子混合物)与裂解液分离,在其余孔位重复洗涤去除杂质后,最后使核酸分子溶解在洗脱液中,弃磁珠于废液中即完成整个实验,得到高纯度的核酸。 2. 样本适用性:能够提取血清、全血、尿液、粪便、拭子洗液、组织等多种样本中的病毒核酸。 3.一次提取时间:≤35分钟。 4. 规格: 64T/盒、 5.保存温度(含组件):室温; 6. 有效期:到用户手上≧8个月 7. CFDA注册证:试剂有相应注册证(或备案信息表)。 8. 使用方法: 8.1.蛋白酶K配制: 每支蛋白酶K干粉中加入1.4 ml蛋白酶K稀释液,颠倒混匀10次,使其完全溶解,即可使用。溶解后置于-20℃保存。反复冻融不得超过5次,且室温放置不超过6小时。 8.2.预封装深孔板准备:试剂盒中取出真空包装的预封装深孔板,颠倒混匀数次使磁珠重悬,去掉真空包装,轻甩孔板,使试剂及磁珠均集中到孔板底部 (也可使用孔板离心机,500rpm×1min进行离心),使用前小心撕去铝箔封口膜,避免孔板振动,防止液体溅出。 8.3.自动化仪器提取步骤: 8.3.1. 在96孔板的第1、7列中分别加入20μl 蛋白酶 K、200μl 样本。 8.3.2. 按以下程序进行自动化提取: 步骤1:槽位:2,名 称:移磁珠,等待时间(min):0,混合时间(min)1,磁吸时间(sec):60,混合速度:中,体积(ul):600,温度状态:关闭。 步骤2:槽位:1,名 称:裂解,等待时间(min):0,混合时间(min)15,磁吸时间(sec):90,混合速度:中,体积(ul):750,温度状态:裂解加热,温度(℃):90。 步骤3:槽位:3,名 称:洗涤1,等待时间(min):0,混合时间(min)2,磁吸时间(sec):90,混合速度:中,体积(ul):700,温度状态:洗脱加热,温度(℃):85。 步骤4:槽位:4,名 称:洗涤2,等待时间(min):0,混合时间(min)0,磁吸时间(sec):30,混合速度:中,体积(ul):700,温度状态:洗脱加热,温度(℃):85。 步骤5:槽位:6,名 称:洗涤2,等待时间(min):0,混合时间(min)5,磁吸时间(sec):90,混合速度:中,体积(ul):100,温度状态:洗脱加热,温度(℃):85。 步骤6:槽位:2,名 称:弃磁珠,等待时间(min):0,混合时间(min)1,磁吸时间(sec):0,混合速度:中,体积(ul):600,温度状态:关闭。 8.3.3自动化程序结束后,将第6、12列的洗脱液转移至干净的无核酸酶离心管中。 9.试剂配备有二维码,扫描二维码,识别试剂种类,并运行相应提取程序,记录实验时间、试剂批号、生产日期等信息,使所有实验数据可溯源。 (18)品目号1-14禽流感H5荧光RT-PCR试剂盒、品目号1-15禽流感H7荧光RT-PCR试剂盒、品目号1-16禽流感H9荧光RT-PCR试剂盒、品目号1-17鸭瘟荧光RT-PCR试剂盒、品目号1-28猪瘟荧光RT-PCR试剂盒、品目号1-31小反刍兽疫荧光RT-PCR试剂盒、品目号1-32鸡新城疫荧光RT-PCR试剂盒、品目号1-33猪伪狂犬荧光RT-PCR试剂盒、品目号1-34口蹄疫荧光RT-PCR试剂盒、品目号1-35猪兰耳病(变异株)荧光RT-PCR试剂盒 小反刍兽疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒、高致病蓝耳病病毒荧光RT-PCR检测试剂盒、猪瘟病毒荧光RT-PCR检测试剂盒、口蹄疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒、伪狂犬病毒荧光RT-PCR检测试剂盒. 1.灵敏度:试剂盒灵敏度能够达到100拷贝以内。 2.敏感性:高致病蓝耳病病毒荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有高致病蓝耳病病毒。猪瘟病毒荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有猪瘟病毒。口蹄疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有亚型口蹄疫病毒。伪狂犬病毒荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有伪狂犬病毒。小反刍兽疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有小反刍兽疫病毒。 3.特异性:对于其余动物病毒,相应试剂盒检测结果应为阴性。 4.试剂盒要求可以反复冻融,RNA类试剂盒采用固态、可常温保存反转录酶,并以单管单酶方式分装。 5.试剂盒的阴、阳性对照与样品一起参与核酸提取、反转录、PCR全过程,能够对实验全程进行监控。 6.有效期:到用户手上保质期大于等于8个月。 禽流感病毒H5亚型荧光RT-PCR检测试剂盒、禽流感病毒H7亚型荧光RT-PCR检测试剂盒、禽流感病毒H9亚型荧光RT-PCR检测试剂盒,新城疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒,鸭瘟病毒荧光RT-PCR检测试剂盒,符合以下技术要求: 1.符合《H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》,《H7亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》,《H9亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》,《新城疫病毒荧光RT-PCR检测方法》,《鸭瘟病毒荧光RT-PCR检测方法》国家标准要求。 20.灵敏度:对于感染性鸡胚尿囊液,荧光RT-PCR检测的最高稀释度为10-8~10-7,与鸡胚病毒分离灵敏度接近。能够检测禽肉和组织脏器中的禽流感、新城疫病毒,与鸡胚病毒分离灵敏度接近。 3.敏感性:禽流感病毒H5亚型荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有H5亚型流感病毒。禽流感病毒H7亚型荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有H7亚型流感病毒。禽流感病毒H9亚型荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有H9亚型流感病毒。新城疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有新城疫病毒。鸭瘟病毒荧光RT-PCR检测试剂盒能够检测所有鸭瘟病毒。 4.特异性:对于其余禽类疾病,相应试剂盒检测结果应为阴性。 5.新城疫病毒试剂盒采用固态,可常温保存反转录酶,并以单管单酶方式分装。试剂盒要求可以反复冻融。 6.禽流感病毒H5亚型荧光RT-PCR检测试剂盒获得农业部新兽药证书。 7.有效期:到用户手上保质期大于等于8个月。。
6、验收
6.1验收应按照招标文件、乙方投标文件的规定或约定进行,具体如下:
验收期次验收期次说明 1按合同验收 7、支付方式数据表格 支付期次支付比例(%)支付期次说明 195供货验收后,按照合同先支付95% 2 5余款1年后付清。 。
6.2本项目是否邀请其他投标人参与验收:
不邀请。
7、合同款项的支付应按照招标文件的规定进行,具体如下:
支付期次 | 支付比例(%) | 支付期次说明 |
1 | 100 | 供货验收合格后,支付全款。 |
8、履约保证金
无。
9、合同有效期
18个月。
10、违约责任
根据合同法。
11、知识产权
11.1乙方提供的采购标的应符合国家知识产权法律、法规的规定且非假冒伪劣品;乙方还应保证甲方不受到第三方关于侵犯知识产权及专利权、商标权或工业设计权等知识产权方面的指控,任何第三方如果提出此方面指控均与甲方无关,乙方应与第三方交涉,并承担可能发生的一切法律责任、费用和后果;若甲方因此而遭致损失,则乙方应赔偿该损失。
11.2若乙方提供的采购标的不符合国家知识产权法律、法规的规定或被有关主管机关认定为假冒伪劣品,则乙方中标资格将被取消;甲方还将按照有关法律、法规和规章的规定进行处理,具体如下:免费更换为合规正品。并承担由此带来的一切后果。
12、解决争议的方法
12.1甲、乙双方协商解决。
12.2若协商解决不成,则通过下列途径之一解决:
提交仲裁委员会仲裁,具体如下:。
向人民法院提起诉讼,具体如下:福州市人民法院。
13、不可抗力
13.1因不可抗力造成违约的,遭受不可抗力一方应及时向对方通报不能履行或不能完全履行的理由,并在随后取得有关主管机关证明后的15日内向另一方提供不可抗力发生及持续期间的充分证据。基于以上行为,允许遭受不可抗力一方延期履行、部分履行或不履行合同,并根据情况可部分或全部免于承担违约责任。
13.2本合同中的不可抗力指不能预见、不能避免、不能克服的客观情况,包括但不限于:自然灾害如地震、台风、洪水、火灾及政府行为、法律规定或其适用的变化或其他任何无法预见、避免或控制的事件。
14、合同条款
根据实际情况填写。招标文件第五章已有规定的,双方均不得对规定进行变更或调整;招标文件第五章未作规定的,双方可通过友好协商进行约定。
15、其他约定
15.1合同文件与本合同具有同等法律效力。
15.2本合同未尽事宜,双方可另行补充。
15.3本合同自签订之日起生效。
15.4本合同纸质文件一式5份。合同电子文本通过政府采购网上公开信息系统自动备案。合同纸质文本需与备案电子文本一致,以备案电子文本为准,具有同等效力。
15.5其他:□无。□无。
甲方: | 福州市农业局 | 乙方: | 福州葆顺牧业有限公司 |
住所: | 福建省福州市仓山区南江滨西大道193号56号楼7层 | 住所: | 福建省福州市台江区八一七中路758号群升国际E区612室 |
单位负责人: | 单位负责人: | 康国斌 | |
委托代理人: | 委托代理人: | ||
联系方法: | 13960701616 | 联系方法: | 18305912566 |
开户银行: | 开户银行: | 华夏银行股份有限公司福州晋安支行 | |
账号: | 账号: | 12255000000135511 |
签订地点:福州
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